以澳洲坚果优良种质A4 (Hidden Valley A4)作为父本,D4 (Renown)为母本,杂交得到110株F1代.通过正交设计建立澳洲坚果的SSR反应体系,利用SSR分子标记技术对该杂交后代的真实性进行分子鉴定.实验表明,20 μL反应体系为:2.0 μL 10×Buffer,2.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,2.0 UTaq聚合酶,0.5 μmoL/L primer,DNA模板20 ng.利用文献中公开的31对SSR引物,从中筛选出在亲本间具有特异性位点且稳定的2对引物用于杂种鉴定.2对引物一共可以从110株A4×D4的杂交后代中鉴定出103株真杂种,鉴定效率为93.6％.其中引物MinuS0007可以鉴定出52株真杂交种,引物MinuS0016鉴定出100株真杂种.31对SSR引物中未发现纯合显性标记.该研究可为澳洲坚果杂种的真实性鉴定提供参考,为进一步研究澳洲坚果杂交后代群体的遗传变异提供了科学依据.