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目的
构建荷载hTERT基因double-shRNA溶瘤腺病毒ZD55-double-hTERT，研究其对前列腺癌DU145细胞的杀伤效果。
方法实时荧光定量PCR法检测对hTERT基因的mRNA表达的影响；Western blot检测对前列腺癌细胞hTERT、病毒E1A蛋白表达的影响；MTT法检测对细胞增殖的抑制作用；Hoechst－33342染色了解不同处理组对前列腺癌细胞凋亡的诱导作用。
结果成功包装病毒ZD55-double-hTERT；RT-PCR和Western blot结果显示：ZD55-double-hTERT组hTERT表达量明显减少，与其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05)，所包装的病毒可以表达E1A蛋白。MTT结果显示：20MOI的各组病毒感染DU145细胞72 h后，ZD55-double-hTERT组细胞存活率为(45.13±3.41)%，显著低于Blank组(81.60±3.31)%、ZD55－hTERT1组(70.51±4.69)%和ZD55-hTERT2组(76.93±1.63)%(P<0.05)。Hoechst-33342染色结果显示：ZD55-double-hTERT(57.29±4.19)%与Blank(3.29±1.73)%、ZD55-hTERT1(23.14±3.56)%、ZD55-hTERT2(33.38±3.55)%相比，DU145细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。
结论荷载hTERT基因double-shRNA溶瘤腺病毒ZD55-double-hTERT与单靶点溶瘤腺病毒比较，对前列腺癌DUl45细胞hTERT基因的沉默作用增强，抑制增殖和促进凋亡的作用进一步提高。