研究硒代蛋氨酸对中波紫外线(UVB)致HaCaT细胞氧化损伤的影响及其可能机制。
方法培养HaCaT细胞,分为4组:①正常对照组,不做任何处理;②硒代蛋氨酸组:分别加入1、10、50、100、200 nmol/L和1 μmol/L硒代蛋氨酸预孵育24 h;③UVB组:30、60、90 mJ/cm2 UVB照射;④硒代蛋氨酸+ UVB组:不同浓度硒代蛋氨酸预孵育24 h后进行不同剂量UVB照射。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平。采用析因设计方差分析、单因素方差分析对数据进行统计学分析,多重比较采用LSD法。
结果析因设计方差分析结果显示,UVB照射对细胞增殖活性有抑制作用(F=128.04, P< 0.05),且随UVB强度增加,细胞增殖活性逐渐下降,组间差异有统计学意义(P< 0.05);硒代蛋氨酸预孵育对细胞增殖活性也有影响(F=5.95, P< 0.05),其中10 nmol/L~1 μmol/L硒代蛋氨酸+ UVB组与UVB组比较,细胞增殖活性显著升高(P< 0.05);UVB照射和硒代蛋氨酸对细胞增殖活性无明显交互作用(F=1.65,P> 0.05)。30 mJ/cm2 UVB照射后,UVB组凋亡率(31.9% ± 2.67%)较正常对照组(4.1% ± 0.67%)显著升高(P< 0.05);而10、50、100、200 nmol/L和1 μmol/L硒代蛋氨酸+ 30 mJ/cm2 UVB组凋亡率[依次为:(21.9 ± 3.72)%、(17.2 ± 1.67)%、(4.6 ± 0.85)%、(7.5 ± 1.86)%、(13.5 ± 1.95)%]均较30 mJ/cm2 UVB组凋亡率显著下降(P< 0.05)。30 mJ/cm2 UVB组与正常对照组相比,SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P< 0.05);10 nmol/L~1 μmol/L硒代蛋氨酸+ 30 mJ/cm2 UVB组与30 mJ/cm2 UVB组比较,SOD和GSH-Px活性增高,MDA含量下降(P< 0.05)。
结论硒代蛋氨酸可以减轻UVB诱导HaCaT细胞氧化损伤,其机制与增强抗氧化酶活性、减少氧自由基有关。