重楼皂苷Ⅱ对人膀胱癌裸鼠移植瘤的影响

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目的:评估重楼提取物单体重楼皂苷Ⅱ(PPⅡ)对人膀胱癌BALB/c裸鼠皮下移植瘤的疗效。方法:体外培养膀胱尿路上皮细胞癌T24细胞株,采用MTT法检测重楼皂苷Ⅱ对T24细胞增殖的影响,计算IC50值;建立荷T24人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤模型,全部成瘤后随机分为4组:对照组(10只):未予治疗;生理盐水组(10只):瘤体局部注射0.9%氯化钠溶液,5mg/kg,1次/周;PPⅡ组(10只):瘤体局部注射PPⅡ,5mg/kg,1次/周;丝裂霉素C对照组(MMC,10只):瘤体局部注射丝裂霉素C,1.5mg/kg,1次/周。连续治疗6周后处死动物,取出肿瘤称重,计算平均留重和抑瘤率,绘制皮下移植瘤生长曲线。相同方法处理裸鼠,观察60d,绘制生存曲线,计算平均生存时间。采用免疫组化方法检测Bcl-2、cytochrome c、caspase-3、caspase-9的表达。结果:重楼皂苷Ⅱ对T24细胞的增殖有明显的抑制作用,24、48、72h的IC50值为8.011,4.148,3.012μmol/L。体内实验阴性对照组皮下移植瘤生长迅速,重楼皂苷Ⅱ组和丝裂霉素组肿瘤生长减慢,重楼皂苷Ⅱ组肿瘤体积减小的趋势与MMC组相仿。治疗30d后皮下移植瘤体积:未治疗组为(1 530.83±37.93)mm3,生理盐水组为(1 510.01±22.18)mm3;重楼皂苷Ⅱ治疗组为(37.83±14.91)mm3,MMC治疗组为(23.28±11.62)mm3。重楼皂苷Ⅱ瘤重抑制率为70.32%,MMC组为76.59%。重楼皂苷Ⅱ组的平均生存时间为(48.70±3.07)d。病理切片见重楼皂苷Ⅱ治疗后,有广泛的细胞核浓缩,核碎裂,胞浆红染,部分区域呈现均质红染。免疫组化检查示重楼皂苷Ⅱ瘤体内注射治疗后主要引起了cytochrome c蛋白表达的增加。结论:重楼皂苷Ⅱ在体外、体内的实验中均见到其能抑制膀胱癌细胞的生长。重楼皂苷Ⅱ可能是通过线粒体凋亡途径引起细胞的凋亡,从而发挥抗膀胱癌的作用。
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