目的建立高效液相色谱（HPLC）法同时测定复方三维右旋泛酸钙糖浆中维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆和烟酰胺的含量。方法采用外标法进行测定,色谱柱为Thermo Betasil C₁₈ Analytical（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-5 mmol·L^-1十二烷基硫酸钠（含0.05%甲酸）水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长260nm,柱温30℃。分别测定10批复方三维右旋泛酸钙糖浆。结果维生素B₁、维生素B₂、维生素_B6、烟酰胺4种成分的线性范围分别为5.76¹15.2μg·mL^-1（r=0.999 9）、1.16²3.20μg·mL^-1（r=0.999 9）、1.72³4.4μg·mL^-1（r=0.999 6）和5.76¹15.2μg·mL^-1（r=0.999 9）,平均加样回收率为96.2%⁹8.4%（RSD为2.14%³.42%）。不同批次复方三维右旋泛酸钙糖浆中维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、烟酰胺含量范围分别为0.133 7⁰.155 9、0.027 86⁰.030 71、0.039 05⁰.047 7、0.138 7⁰.148 2 mg·g^-1。结论该方法为完善复方三维右旋泛酸钙糖浆的质量标准和加强质量控制提供了新的方法和依据。