烧伤患者铜绿假单胞菌获得性耐药基因和菌株亲缘性研究

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目的

调查分离自烧伤患者的40株铜绿假单胞菌获得性耐药基因和菌株间的亲缘性。

方法

选择笔者单位烧伤科2014年1月—2015年12月自烧伤患者分离出的40株铜绿假单胞菌,每年20株。采用K-B纸片扩散法检测分离出的菌株对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星等9种抗菌药物的敏感性。采用PCR法检测9种β内酰胺类抗菌药物获得性耐药基因、外膜孔蛋白oprD2基因、12种氨基糖苷类抗菌药物获得性耐药基因、6种消毒剂获得性耐药基因与可移动遗传元件遗传标记基因,选取阳性表达基因进行DNA测序及比对。对40株铜绿假单胞菌的28种获得性耐药基因序列进行非加权组平均法聚类分析。

结果

40株铜绿假单胞菌对上述9种抗菌药物均耐药。40株铜绿假单胞菌共检出blaTEMblaCARB2种β内酰胺类抗菌药物获得性耐药基因,aac(6′)-Ⅰbaac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ、rmtB 5种氨基糖苷类抗菌药物获得性耐药基因,qacE△1-sul1、merA、intⅠ1 3种消毒剂获得性耐药基因及可移动遗传元件遗传标记基因,并均存在外膜孔蛋白oprD2基因缺失。40株铜绿假单胞菌聚集特征明显,共有7种基因模式和3个克隆株。2~4、6~9、11、14、17~39号菌株携带的耐药基因序列相似,亲缘性高;12、13号菌株携带的耐药基因序列相似,亲缘性高;10、16号菌株携带的耐药基因序列相似,亲缘性高。

结论

blaTEMblaCARBaac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ、rmtB、qacE△1-sul1、merA、intⅠ1在烧伤患者铜绿假单胞菌菌株中流行且均存在oprD2基因缺失,可能是导致铜绿假单胞菌对β内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物均耐药的重要原因,耐药表型与基因型相符率高。烧伤患者检出铜绿假单胞菌耐药基因相似,菌株间亲缘性高。

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