重组羧肽酶原B的复性方法研究

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wanmei_zxn

【摘要】

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构建的羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中获得高表达.但目的蛋白是以包涵体的形式存在.为了获得活性羧肽酶B,必须对其包涵体进行变复性.首先利用稀释复性确定了羧肽酶原B复性的

【作者】

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张晓彦刘海峰袁勤生

【机构】

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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

【出处】

：

微生物学通报

【发表日期】

：

2005年2期

【关键词】

：

羧肽酶原B 包涵体凝胶过滤稀释透析 Ni^2+亲合层析 Pro-carboxypeptidase B Inclusion bodies Urea gr

【基金项目】

：

上海市重点学科建设项目

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构建的羧肽酶原B表达质粒在大肠杆菌中获得高表达.但目的蛋白是以包涵体的形式存在.为了获得活性羧肽酶B,必须对其包涵体进行变复性.首先利用稀释复性确定了羧肽酶原B复性的最佳缓冲液;在凝胶过滤复性中,研究了柱长和洗脱流速对羧肽酶原B复性效率的影响;另外对比了稀释复性、透析复性、凝胶层析复性和Ni2+亲合层析法等四种方法对羧肽酶原B的复性效果.结果发现,这4种方法的复性效果有以下顺序:凝胶过滤复性>稀释复性>Ni2+亲合层析>透析复性.

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