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摘要：对12个青花菜（Brassica oleracea L. var. botryti L.）品种的花球及叶片中的硫苷含量及组成进行了分析测定，结果表明，青花菜中含有9种硫代葡萄糖苷，分别为3-甲基硫氧烯丙基硫苷（IBE）、2-羟基-3-丁烯基硫苷（PRO）、2-丙烯基硫苷（SIN）、4-甲硫基-3-丁烯基硫苷（RAA）、3-丁烯基硫苷（NAP）、4-羟基吲哚基-3-甲基硫苷（4OH）、3-甲基吲哚基硫苷（GBC）、4-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（4ME）、1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（NEO）。青花菜花球中的硫苷含量是叶片中的1～5倍不等，不同品种之间存在差异性。RAA是青花菜中含量最多的硫苷组分。
关键词：青花菜；花球；叶片；硫代葡萄糖苷
中圖分类号： S635.301 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0300-04
青花菜（Brassica oleracea L. var. botryti L.）属于十字花科芸薹属甘蓝种的变种，为一、二年生草本植物。硫代葡萄糖苷（glucosinolates，GLS，简称硫苷）是一类含硫化合物，是十字花科蔬菜中重要的次生代谢产物。所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷，硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶、种子中[1]。由于侧链R 基团的不同，可把硫苷分为脂肪类、芳香类、吲哚类硫苷3类。硫代葡萄糖苷及其降解产物具有多种生物活性、化学活性，硫代葡萄糖苷已被证实与十字花科蔬菜的风味及营养成分、植物自我保护机制以及人类的身体健康有着密切关系。蔬菜在被食用或机械破碎时，其中所含的硫苷被内源芥子酶水解成多种具有生理活性的降解产物，产物之一的异硫氰酸酯能够有效预防癌症，尤其是膀胱癌、结肠癌和肺癌[2-4]。青花菜富含3-甲基硫氧烯丙基硫苷（glucoiberin）、4-甲基硫氧丁基硫苷（glucoraphanin）、3-甲基吲哚基硫苷（glucobrassicin）以及1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（neoglucobrassicin）[5]。英国科学家已选育出高硫苷含量的青花菜新品种，该品种的抗癌能力是普通青花菜的80 倍[4，6]。不同蔬菜种类或同一蔬菜种类的不同品种、不同生长环境以及同一植株的不同生长阶段、同一植株的不同部位硫苷的含量及组分都存在差别[7-10]。本研究对我国市场上常见的12个青花菜品种的花球、叶片的硫苷含量及组成进行了测定，结合青花菜栽培性状及产量等进行分析，旨在对青花菜育种及副产物综合利用提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料
供试的12个青花菜品种来自北京市农林科学院蔬菜研究中心（表1）。2013年2月1日播种，3月25日定植于北京市农林科学院蔬菜研究中心通州农场，采用露地直播方式，株距50 cm，行距 50 cm，重复3 次。7月24日取新鲜的花球及叶片测定硫苷含量。
1.2 方法
1.2.1 硫苷的提取[11] 取新鲜青花菜花球及叶片，分割成小球或小片，在真空冷冻干燥机内干燥。称量粉碎好的样品0.2 g，放入15 mL塑料管中。加入内标TRO（苯甲基硫苷）0.25 mL，迅速加入100%预热的甲醇，80 ℃下水浴20 min，每隔4～5 min涡旋振荡1次，3 000 r/min离心10 min，取上清液倒入15 mL塑料管中，放在冰盆中。沉淀物继续用70%甲醇提取2次，同上述处理方法，合并上清液，即为样品液。取一次性注射器，加入玻璃棉，塞紧，放在试管上。加入DEAE胶溶液2 mL，用2 mL双蒸水洗涤，加入样品液2 mL。待样品液不再滴下，加入0.02 mol/L NaAc溶液。待不再有液体滴下，将注射器转移到另一试管上，加入75 μL硫酸酯酶溶液，封口过夜。将过夜的注射器用双蒸水洗涤3次，每次 0.5 mL。用注射头挤压注射器，使液体尽可能转移到试管中。将试管中液体通过0.45 μm滤膜转移到小玻璃瓶中，冷冻保存，待用。
1.2.2 硫苷的分析 HPLC分析条件：Nova-Pak C18色谱柱：3.9 mm×150 mm，50 μm，检测波长229 nm，流速 1.0 mL/min，常温，进样量20 μL，梯度洗脱如表2所示。A液：1 g四甲基氯化铵（TMACl）溶于2 L双蒸水中，混匀，抽滤。B液：1 g四甲基氯化铵（TMACl）溶于1.6 L双蒸水中，加入400 mL色谱纯乙腈，混匀抽滤。
采用苯甲基硫苷作为内标，根据保留时间和峰面积测定硫苷组分。利用内标和响应因子计算硫苷含量，硫苷含量计算公式如下：
硫苷含量=脱硫硫苷峰面积×内标量×脱硫硫苷相对响应因子内标峰面积×试样质量。
2 结果与分析
2.1 青花菜中硫苷组分
根据不同保留时间以及特征峰形，可以鉴定得到：3-甲基硫氧烯丙基硫苷（glucoiberin，IBE）、2-羟基-3-丁烯基硫苷（progoitrin，PRO）、2-丙烯基硫苷（sinigrin，SIN）、4-甲基硫氧丁基硫苷（glucoraphanin，RAA）、3-丁烯基硫苷（gluconapin，NAP）、4-羟基吲哚基-3-甲基硫苷（4-hydroxyglucobrassicin，4OH）、苯甲基硫苷（glucotropaeolin，TRO，内标）、3-甲基吲哚基硫苷（glucobrassicin，GBC）、4-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（4-methoxyglucobrassicin，4ME）、1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（neoglucobrassicin，NEO）（图1）。
2.2 不同青花菜品种中总硫苷含量
由图2可以看出，不同青花菜品种间花球及叶片中总硫苷含量差异较大。青花菜花球中，中绿1号的硫苷含量最高，为23.53 μmol/g DW；其次是贡献者，含量为 23.03 μmol/g DW；含量最低的是大帝，为9.19 μmol/g DW。青花菜叶片中，中绿9号总硫苷含量最高，为 10.11 μmol/g DW；其次为中绿5号，为9.86 μmol/g DW；含量最低的是南秀366号，仅为1.93 μmol/g DW。总体而言，青花菜花球中的硫苷含量是叶片的1～5倍不等，不同品种之间存在差异性。 2.3 不同青花菜品种中硫苷组分的分析
目前已从自然界中分离鉴定出120多种硫苷，不同十字花科作物中的硫苷组分不同，其中在芸薹属蔬菜中发现了 15～20种硫苷[12]，青花菜中已报道的则有16种[5]。本试验对12 个青花菜品种的花球和叶片中的硫苷组分进行了测定，共检测出9种硫苷组分（表3、表4）。这9 种硫苷分属于脂肪类、吲哚类，没有检测出芳香类硫苷。
由表3可以看出，9种硫苷组分中，RAA在青花菜花球中含量最多，占硫苷总含量的20.14%～69.42%。南秀366号总硫苷含量为13.31 μmol/g，但RAA含量为9.24 μmol/g，在所有品种中占比最高。野绿总硫苷含量为21.55 μmol/g，但其中RAA仅为4.34 μmol/g，仅占总含量的20.14%。结果表明，不同青花菜栽培种对RAA硫苷在总硫苷含量中所占的比例有影响，这与Schonhof等的检测结果[13]一致。Abercrombie等研究发现，连续2年青花菜双单倍体（自交种）亲本形成的双列杂交群体中，RAA含量呈现显著的常规遗传结合力，但没有发现显著的特殊遗传结合力，常规遗传结合力均方约为特殊遗传结合力均方的14倍，表明常规结合力在预测杂交产生的RAA含量方面比特殊结合力更重要，因此一个给定的自交种与其他自交种结合将产生相对可预测RAA含量的杂交种[14]。青花菜花球是主要的可食部位，因此，青花菜潜在的保健作用主要取决于所选择的栽培品种。
由表4可以看出，RAA在青花菜叶片硫苷组分中占比最高，占总含量的9.33%～56.57%，其中中绿6号总硫苷含量9.25 μmol/g DW，RAA含量为4.76 μmol/g DW；南秀366号总硫苷含量为所有品种中最低，仅为1.93 μmol/g DW，其中RAA占比也最低。叶片的用途与花球不同，叶片是青花菜的副产物，可以作为饲料进行再利用。研究表明，含有β-OH的硫代葡萄糖苷能降解生成2种能导致甲状腺肿大的产物：异硫氰酸盐和唑烷-2-硫，它们通过不同的方式作用于动物或人体的甲状腺造成危害[3-4]。PRO是对营养价值不利的主要硫苷组分[15]。从表4可以看出，PRO占总硫苷含量从1189%～42.83%不等，其中幸运品种PRO含量为0.88 μmol/g DW，硫苷总含量为7.4 μmol/g DW，幸运品种的叶片最适宜进行饲料加工。
青花菜是十字花科蔬菜中4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷（glucoraphanin，RAA）含量最丰富的蔬菜之一[16]。RAA是萝卜硫素前体，萝卜硫素已被证实是迄今为止发现的最强烈的phaseⅡ酶诱导剂，能降低食道癌、结肠癌、乳腺癌等多种癌症的发病率[2-5，17-19]。其他硫苷的同源异硫氰酸盐的抗癌功效也有报道，如 3-甲基吲哚基硫苷（glucobrassicin，GBC）的水解产物吲哚-3-甲醇能够調节生物转化酶的活性，从而抑制乳腺癌、前列腺癌细胞的活性[20-21]。
不同蔬菜和品种中硫苷含量的差异可以归结为基因型不同[22]，同时受环境因素的影响。Farnham等对生长在3个不同环境下的9种不同基因型的青花菜硫苷含量进行了研究，发现环境对硫苷含量影响显著，RAA是唯一显著受基因型影响的硫苷，对RAA含量的影响因素中，基因型效应占528%，基因型和环境互作效应小于基因型[10]。本试验中所有青花菜品种均生长在同一环境中，栽培条件基本相同，因此硫苷含量差异主要取决于品种本身基因差异。
3 结论
本研究结果表明，青花菜中检测到9种硫代葡萄糖苷，分别为3-甲基硫氧烯丙基硫苷（IBE）、2-羟基-3-丁烯基硫苷（PRO）、2-丙烯基硫苷（SIN）、4-甲硫基-3-丁烯基硫苷（RAA）、3-丁烯基硫苷（NAP）、4-羟基吲哚基-3-甲基硫苷（4OH）、3-甲基吲哚基硫苷（GBC）、4-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（4ME）、1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（NEO）。这9种硫苷分属于吲哚类与脂肪类，没有检测到芳香类硫苷。其中4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷是青花菜中的主要硫苷。南秀366号花球中RAA含量占比最高，叶片中RAA含量占比最低，具有潜在的应用前景。
参考文献：
[1]季宇彬，武晓丹，邹 翔.硫代葡萄糖苷的研究[J]. 哈尔滨商业大学学报：自然科学版，2005，21（5）：550-554.
[2]Cartea M E，Velasco P. Glucosinolates in brassica foods：Bioavailability in food and significance for human health[J]. Phytochemistry Reviews，2008，7（2）：213-229.
[3]Manson M M，Ball H W，Barrett M C，et al. Mechanism of action of dietary chemoprotective agents in rat liver：induction of phase Ⅰ and Ⅱ drug metabolizing enzymes and aflatoxin B1 metabolism[J]. Carcinogenesis，1997，18（9）：1729-1738.
[4]Mithen R，Faulkner K，Magrath R，et al. Development of isothiocyanate-enriched broccoli，and its enhanced ability to induce phase 2 detoxification enzymes in mammalian cells[J]. Theoretical and Applied Genetics，2003，106（4）：727-734. [5]Latté K P，Appel K E，Lampen A. Health benefits and possible risks of broccoli：an overview[J]. Food and Chemical Toxicology，2011，49（12）：3287-3309.
[6]Sarikamis G，Marquez J，Maccormack R，et al. High glucosinolate broccoli：A delivery system for sulforaphane[J]. Molecular Breeding，2006，18（3）：219-228.
[7]何洪巨，陈 杭，Schnitzler W H. 芸薹属蔬菜中硫代葡萄糖苷鉴定与含量分析[J]. 中国农业科学，2002，35（2）：192-197.
[8]Sun B，Liu N，Zhao Y T，et al. Variation of glucosinolates in three edible parts of Chinese kale （Brassica alboglabra Bailey） varieties[J]. Food Chemistry，2011，124（3）：941-947.
[9]Brown P D，Tokuhisa J G，Reichelt M，et al. Variation of glucosinolate accumulation among different organs and developmental stages of Arabidopsis thaliana[J]. Phytochemistry，2003，62（3）：471-481.
[10]Farnham M W，Wilson P E，Stephenson K K，et al. Genetic and environmental effects on glucosinolate content and chemoprotective potency of broccoli[J]. Plant Breeding，2004，123（1）：60-65.
[11] He H，Ping L，Bonnema G，et al. Genetic variation in glucosinolate content within Brassica rapa vegetables [J]. Acta Horticulturae，2012，944：129-140.
[12]Fahey J W，Zalcmann A T，Talalay P. The chemical diversity and distribution of glucosinolates and isothiocyanates among plants[J]. Phytochemistry，2001，56（1）：5-51.
[13]Schonhof I，Krumbein A，Brückner B. Genotypic effects on glucosinolates and sensory properties of broccoli and cauliflower[J]. Die Nahrung，2004，48（1）：25-33.
[14]Abercrombie J M，Farnham M W，Rushing J W. Genetic combining ability of glucoraphanin level and other horticultural traits of broccoli[J]. Euphytica，2005，143（1/2）：145-151.
[15]Halkier B A，Gershenzon J. Biology and biochemistry of glucosinolates[J]. Annual Review of Plant Biology，2006，57：303-333.
[16] Vallejo F，Tomás-Barberán F A，García-Viguera C. Potential bioactive compounds in health promotion from broccoli cultivars grown in Spain [J]. Journal of Science of Food and Agriculture，2002，82：1293-1297.
[17]Juge N，Mithen R F，Traka M. Molecular basis for chemoprevention by sulforaphane：A comprehensive review[J]. Cellular and Molecular Life Sciences，2007，64（9）：1105-1127.
[18]姚丹燕，吴秋云，李 倩，等. 萝卜硫素调控机制的研究进展[J]. 园艺学报，2014，41（5）：1020-1026.
[19]单彦卿，张建丽，何洪巨.十字花科植物中硫代葡萄糖苷及萝卜硫素的性质研究[J]. 食品科技，2007，32（9）：110-112.
[20]Brew C T，Aronchik I，Kosco K，et al. Indole-3-carbinol inhibits MDA-MB-231 breast cancer cell motility and induces stress fibers and focal adhesion formation by activation of Rho kinase activity[J]. International Journal of Cancer，2009，124（10）：2294-2302.
[21]Weng J R，Tsai C H，Kulp S K，et al. Indole-3-carbinol as a chemopreventive and anti-cancer agent[J]. Cancer Letters，2008，262（2）：153-163.
[22]劉 哲，张秋萍，苏小俊，等. 萝卜硫苷合成和调节相关基因研究进展[J]. 江苏农业科学，2015，43（6）：168-170.
关键词：青花菜；花球；叶片；硫代葡萄糖苷
中圖分类号： S635.301 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）07-0300-04
青花菜（Brassica oleracea L. var. botryti L.）属于十字花科芸薹属甘蓝种的变种，为一、二年生草本植物。硫代葡萄糖苷（glucosinolates，GLS，简称硫苷）是一类含硫化合物，是十字花科蔬菜中重要的次生代谢产物。所有的十字花科植物都能够合成硫代葡萄糖苷，硫代葡萄糖苷存在于这些植物的根、茎、叶、种子中[1]。由于侧链R 基团的不同，可把硫苷分为脂肪类、芳香类、吲哚类硫苷3类。硫代葡萄糖苷及其降解产物具有多种生物活性、化学活性，硫代葡萄糖苷已被证实与十字花科蔬菜的风味及营养成分、植物自我保护机制以及人类的身体健康有着密切关系。蔬菜在被食用或机械破碎时，其中所含的硫苷被内源芥子酶水解成多种具有生理活性的降解产物，产物之一的异硫氰酸酯能够有效预防癌症，尤其是膀胱癌、结肠癌和肺癌[2-4]。青花菜富含3-甲基硫氧烯丙基硫苷（glucoiberin）、4-甲基硫氧丁基硫苷（glucoraphanin）、3-甲基吲哚基硫苷（glucobrassicin）以及1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（neoglucobrassicin）[5]。英国科学家已选育出高硫苷含量的青花菜新品种，该品种的抗癌能力是普通青花菜的80 倍[4，6]。不同蔬菜种类或同一蔬菜种类的不同品种、不同生长环境以及同一植株的不同生长阶段、同一植株的不同部位硫苷的含量及组分都存在差别[7-10]。本研究对我国市场上常见的12个青花菜品种的花球、叶片的硫苷含量及组成进行了测定，结合青花菜栽培性状及产量等进行分析，旨在对青花菜育种及副产物综合利用提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料
供试的12个青花菜品种来自北京市农林科学院蔬菜研究中心（表1）。2013年2月1日播种，3月25日定植于北京市农林科学院蔬菜研究中心通州农场，采用露地直播方式，株距50 cm，行距 50 cm，重复3 次。7月24日取新鲜的花球及叶片测定硫苷含量。
1.2 方法
1.2.1 硫苷的提取[11] 取新鲜青花菜花球及叶片，分割成小球或小片，在真空冷冻干燥机内干燥。称量粉碎好的样品0.2 g，放入15 mL塑料管中。加入内标TRO（苯甲基硫苷）0.25 mL，迅速加入100%预热的甲醇，80 ℃下水浴20 min，每隔4～5 min涡旋振荡1次，3 000 r/min离心10 min，取上清液倒入15 mL塑料管中，放在冰盆中。沉淀物继续用70%甲醇提取2次，同上述处理方法，合并上清液，即为样品液。取一次性注射器，加入玻璃棉，塞紧，放在试管上。加入DEAE胶溶液2 mL，用2 mL双蒸水洗涤，加入样品液2 mL。待样品液不再滴下，加入0.02 mol/L NaAc溶液。待不再有液体滴下，将注射器转移到另一试管上，加入75 μL硫酸酯酶溶液，封口过夜。将过夜的注射器用双蒸水洗涤3次，每次 0.5 mL。用注射头挤压注射器，使液体尽可能转移到试管中。将试管中液体通过0.45 μm滤膜转移到小玻璃瓶中，冷冻保存，待用。
1.2.2 硫苷的分析 HPLC分析条件：Nova-Pak C18色谱柱：3.9 mm×150 mm，50 μm，检测波长229 nm，流速 1.0 mL/min，常温，进样量20 μL，梯度洗脱如表2所示。A液：1 g四甲基氯化铵（TMACl）溶于2 L双蒸水中，混匀，抽滤。B液：1 g四甲基氯化铵（TMACl）溶于1.6 L双蒸水中，加入400 mL色谱纯乙腈，混匀抽滤。
采用苯甲基硫苷作为内标，根据保留时间和峰面积测定硫苷组分。利用内标和响应因子计算硫苷含量，硫苷含量计算公式如下：
硫苷含量=脱硫硫苷峰面积×内标量×脱硫硫苷相对响应因子内标峰面积×试样质量。
2 结果与分析
2.1 青花菜中硫苷组分
根据不同保留时间以及特征峰形，可以鉴定得到：3-甲基硫氧烯丙基硫苷（glucoiberin，IBE）、2-羟基-3-丁烯基硫苷（progoitrin，PRO）、2-丙烯基硫苷（sinigrin，SIN）、4-甲基硫氧丁基硫苷（glucoraphanin，RAA）、3-丁烯基硫苷（gluconapin，NAP）、4-羟基吲哚基-3-甲基硫苷（4-hydroxyglucobrassicin，4OH）、苯甲基硫苷（glucotropaeolin，TRO，内标）、3-甲基吲哚基硫苷（glucobrassicin，GBC）、4-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（4-methoxyglucobrassicin，4ME）、1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（neoglucobrassicin，NEO）（图1）。
2.2 不同青花菜品种中总硫苷含量
由图2可以看出，不同青花菜品种间花球及叶片中总硫苷含量差异较大。青花菜花球中，中绿1号的硫苷含量最高，为23.53 μmol/g DW；其次是贡献者，含量为 23.03 μmol/g DW；含量最低的是大帝，为9.19 μmol/g DW。青花菜叶片中，中绿9号总硫苷含量最高，为 10.11 μmol/g DW；其次为中绿5号，为9.86 μmol/g DW；含量最低的是南秀366号，仅为1.93 μmol/g DW。总体而言，青花菜花球中的硫苷含量是叶片的1～5倍不等，不同品种之间存在差异性。 2.3 不同青花菜品种中硫苷组分的分析
目前已从自然界中分离鉴定出120多种硫苷，不同十字花科作物中的硫苷组分不同，其中在芸薹属蔬菜中发现了 15～20种硫苷[12]，青花菜中已报道的则有16种[5]。本试验对12 个青花菜品种的花球和叶片中的硫苷组分进行了测定，共检测出9种硫苷组分（表3、表4）。这9 种硫苷分属于脂肪类、吲哚类，没有检测出芳香类硫苷。
由表3可以看出，9种硫苷组分中，RAA在青花菜花球中含量最多，占硫苷总含量的20.14%～69.42%。南秀366号总硫苷含量为13.31 μmol/g，但RAA含量为9.24 μmol/g，在所有品种中占比最高。野绿总硫苷含量为21.55 μmol/g，但其中RAA仅为4.34 μmol/g，仅占总含量的20.14%。结果表明，不同青花菜栽培种对RAA硫苷在总硫苷含量中所占的比例有影响，这与Schonhof等的检测结果[13]一致。Abercrombie等研究发现，连续2年青花菜双单倍体（自交种）亲本形成的双列杂交群体中，RAA含量呈现显著的常规遗传结合力，但没有发现显著的特殊遗传结合力，常规遗传结合力均方约为特殊遗传结合力均方的14倍，表明常规结合力在预测杂交产生的RAA含量方面比特殊结合力更重要，因此一个给定的自交种与其他自交种结合将产生相对可预测RAA含量的杂交种[14]。青花菜花球是主要的可食部位，因此，青花菜潜在的保健作用主要取决于所选择的栽培品种。
由表4可以看出，RAA在青花菜叶片硫苷组分中占比最高，占总含量的9.33%～56.57%，其中中绿6号总硫苷含量9.25 μmol/g DW，RAA含量为4.76 μmol/g DW；南秀366号总硫苷含量为所有品种中最低，仅为1.93 μmol/g DW，其中RAA占比也最低。叶片的用途与花球不同，叶片是青花菜的副产物，可以作为饲料进行再利用。研究表明，含有β-OH的硫代葡萄糖苷能降解生成2种能导致甲状腺肿大的产物：异硫氰酸盐和唑烷-2-硫，它们通过不同的方式作用于动物或人体的甲状腺造成危害[3-4]。PRO是对营养价值不利的主要硫苷组分[15]。从表4可以看出，PRO占总硫苷含量从1189%～42.83%不等，其中幸运品种PRO含量为0.88 μmol/g DW，硫苷总含量为7.4 μmol/g DW，幸运品种的叶片最适宜进行饲料加工。
青花菜是十字花科蔬菜中4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷（glucoraphanin，RAA）含量最丰富的蔬菜之一[16]。RAA是萝卜硫素前体，萝卜硫素已被证实是迄今为止发现的最强烈的phaseⅡ酶诱导剂，能降低食道癌、结肠癌、乳腺癌等多种癌症的发病率[2-5，17-19]。其他硫苷的同源异硫氰酸盐的抗癌功效也有报道，如 3-甲基吲哚基硫苷（glucobrassicin，GBC）的水解产物吲哚-3-甲醇能够調节生物转化酶的活性，从而抑制乳腺癌、前列腺癌细胞的活性[20-21]。
不同蔬菜和品种中硫苷含量的差异可以归结为基因型不同[22]，同时受环境因素的影响。Farnham等对生长在3个不同环境下的9种不同基因型的青花菜硫苷含量进行了研究，发现环境对硫苷含量影响显著，RAA是唯一显著受基因型影响的硫苷，对RAA含量的影响因素中，基因型效应占528%，基因型和环境互作效应小于基因型[10]。本试验中所有青花菜品种均生长在同一环境中，栽培条件基本相同，因此硫苷含量差异主要取决于品种本身基因差异。
3 结论
本研究结果表明，青花菜中检测到9种硫代葡萄糖苷，分别为3-甲基硫氧烯丙基硫苷（IBE）、2-羟基-3-丁烯基硫苷（PRO）、2-丙烯基硫苷（SIN）、4-甲硫基-3-丁烯基硫苷（RAA）、3-丁烯基硫苷（NAP）、4-羟基吲哚基-3-甲基硫苷（4OH）、3-甲基吲哚基硫苷（GBC）、4-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（4ME）、1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷（NEO）。这9种硫苷分属于吲哚类与脂肪类，没有检测到芳香类硫苷。其中4-甲硫基-3-丁烯基硫代葡萄糖苷是青花菜中的主要硫苷。南秀366号花球中RAA含量占比最高，叶片中RAA含量占比最低，具有潜在的应用前景。
参考文献：
[1]季宇彬，武晓丹，邹 翔.硫代葡萄糖苷的研究[J]. 哈尔滨商业大学学报：自然科学版，2005，21（5）：550-554.
[2]Cartea M E，Velasco P. Glucosinolates in brassica foods：Bioavailability in food and significance for human health[J]. Phytochemistry Reviews，2008，7（2）：213-229.
[3]Manson M M，Ball H W，Barrett M C，et al. Mechanism of action of dietary chemoprotective agents in rat liver：induction of phase Ⅰ and Ⅱ drug metabolizing enzymes and aflatoxin B1 metabolism[J]. Carcinogenesis，1997，18（9）：1729-1738.
[4]Mithen R，Faulkner K，Magrath R，et al. Development of isothiocyanate-enriched broccoli，and its enhanced ability to induce phase 2 detoxification enzymes in mammalian cells[J]. Theoretical and Applied Genetics，2003，106（4）：727-734. [5]Latté K P，Appel K E，Lampen A. Health benefits and possible risks of broccoli：an overview[J]. Food and Chemical Toxicology，2011，49（12）：3287-3309.
[6]Sarikamis G，Marquez J，Maccormack R，et al. High glucosinolate broccoli：A delivery system for sulforaphane[J]. Molecular Breeding，2006，18（3）：219-228.
[7]何洪巨，陈 杭，Schnitzler W H. 芸薹属蔬菜中硫代葡萄糖苷鉴定与含量分析[J]. 中国农业科学，2002，35（2）：192-197.
[8]Sun B，Liu N，Zhao Y T，et al. Variation of glucosinolates in three edible parts of Chinese kale （Brassica alboglabra Bailey） varieties[J]. Food Chemistry，2011，124（3）：941-947.
[9]Brown P D，Tokuhisa J G，Reichelt M，et al. Variation of glucosinolate accumulation among different organs and developmental stages of Arabidopsis thaliana[J]. Phytochemistry，2003，62（3）：471-481.
[10]Farnham M W，Wilson P E，Stephenson K K，et al. Genetic and environmental effects on glucosinolate content and chemoprotective potency of broccoli[J]. Plant Breeding，2004，123（1）：60-65.
[11] He H，Ping L，Bonnema G，et al. Genetic variation in glucosinolate content within Brassica rapa vegetables [J]. Acta Horticulturae，2012，944：129-140.
[12]Fahey J W，Zalcmann A T，Talalay P. The chemical diversity and distribution of glucosinolates and isothiocyanates among plants[J]. Phytochemistry，2001，56（1）：5-51.
[13]Schonhof I，Krumbein A，Brückner B. Genotypic effects on glucosinolates and sensory properties of broccoli and cauliflower[J]. Die Nahrung，2004，48（1）：25-33.
[14]Abercrombie J M，Farnham M W，Rushing J W. Genetic combining ability of glucoraphanin level and other horticultural traits of broccoli[J]. Euphytica，2005，143（1/2）：145-151.
[15]Halkier B A，Gershenzon J. Biology and biochemistry of glucosinolates[J]. Annual Review of Plant Biology，2006，57：303-333.
[16] Vallejo F，Tomás-Barberán F A，García-Viguera C. Potential bioactive compounds in health promotion from broccoli cultivars grown in Spain [J]. Journal of Science of Food and Agriculture，2002，82：1293-1297.
[17]Juge N，Mithen R F，Traka M. Molecular basis for chemoprevention by sulforaphane：A comprehensive review[J]. Cellular and Molecular Life Sciences，2007，64（9）：1105-1127.
[18]姚丹燕，吴秋云，李 倩，等. 萝卜硫素调控机制的研究进展[J]. 园艺学报，2014，41（5）：1020-1026.
[19]单彦卿，张建丽，何洪巨.十字花科植物中硫代葡萄糖苷及萝卜硫素的性质研究[J]. 食品科技，2007，32（9）：110-112.
[20]Brew C T，Aronchik I，Kosco K，et al. Indole-3-carbinol inhibits MDA-MB-231 breast cancer cell motility and induces stress fibers and focal adhesion formation by activation of Rho kinase activity[J]. International Journal of Cancer，2009，124（10）：2294-2302.
[21]Weng J R，Tsai C H，Kulp S K，et al. Indole-3-carbinol as a chemopreventive and anti-cancer agent[J]. Cancer Letters，2008，262（2）：153-163.
[22]劉 哲，张秋萍，苏小俊，等. 萝卜硫苷合成和调节相关基因研究进展[J]. 江苏农业科学，2015，43（6）：168-170.