【摘 要】
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目的 获得流行性乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)SA14-14-2株囊膜蛋白抗原域Ⅲ基因并在大肠杆菌中表达,为进一步研发JEV血清学检测试剂盒提供抗原.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
【机 构】
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浙江省疾病预防控制中心,杭州,310009
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目的 获得流行性乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)SA14-14-2株囊膜蛋白抗原域Ⅲ基因并在大肠杆菌中表达,为进一步研发JEV血清学检测试剂盒提供抗原.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增JEV SA14-14-2株囊膜蛋白抗原域Ⅲ测序,并定向克隆入原核表达载体pET-28a,构建原核重组表达质粒pET-EⅢ,转化大肠埃氏菌(Escherichia coli,E. coli)BL21菌株,并经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导在大肠杆菌中表达SA14-14-2株囊膜蛋白抗原域Ⅲ.结果 扩增的SA14-14-2株JEV囊膜蛋白截片段基因与发表的SA14-14-2株基因序列完全一致,构建了原核表达载体并在大肠杆菌中得到了表达,且表达产物具有免疫反应性.结论 在大肠杆菌中表达了囊膜蛋白抗原域Ⅲ基因,为进一步研发JEV血清学检测试剂盒提供了抗原.
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