rhL Tα衍生物的构建、细菌表达和纯化

来源 :生物化学与生物物理学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wqkabc0
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应用PCR方法,构建了N端缺失27个氨基酸的重组人淋巴毒素α衍生物cDNA,将其插入表达载体后转化大肠杆菌并诱导表达。表达产物以包涵体形式存在,其量占菌体总蛋白的60%~80%。溶解包涵体,将产物复性并纯化后,其纯度达95%以上。以小鼠L929细胞检测表达产物的细胞毒活性,比活性高于2×108国际单位每毫克蛋白质。抗人淋巴毒素的单克隆抗体能中和它的细胞毒活性。初步研究了这种人淋巴毒素衍生物的体外和体内抗肿瘤活性。
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