青霉素G酰化酶通用表达载体的构建方法初探

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结合信号肽预测软件(Signal P)对现有的青霉素G酰化酶(PGA)的大肠杆菌-枯草杆菌穿梭表达质粒pZ01进行信号肽的合理设计,在其C-端置换2个氨基酸,即引入NotI酶切位点序列,从而构建成PGA的通用表达载体.将粪产碱杆菌(Alcdigenesfaecdis)的PGA基因导入其中,构建成表达质粒pzfpganoti.,转入枯草杆菌进行表达,测活结果显示,表达产物具有生物活性(酶的平均活力为0.18 U/ml发酵液).为进一步应用信号肽预测软件进行表达系统的研究、设计打下了基础.
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