蜂毒肽基因在大肠杆菌中的表达、纯化及初步鉴定

来源 :中国生化药物杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:evaxiang
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目的通过pGEX-2T原核表达载体表达蜂毒肽。方法将人工合成整合了肠激酶作用住点的蜂毒肽基因,插入载体pGEX-2T,构建蜂毒肽与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达载体pGEX-MEL。重组质粒转化E-coliBL21(DE3)诱导表达,超声破碎菌体,SDS—PAGE检测蛋白表达情况,取超声上清,通过GST亲和色谱系统纯化目的融合蛋白,酶切通过溶血实验检测其溶血活性。结果SDS-PAGE结果显示,表达了相对分子质量约为30000的融合蛋白,目的融合蛋白量约占菌体总蛋白量的29.5%。经Westernbl
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