【摘 要】
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目的 观察ALDH1A2基因过表达对LoVo细胞增殖、侵袭及黏附能力的影响.方法 将携带有人外源性ALDH1A2基因的真核表达质粒转染人结肠癌细胞株LoVo细胞,分别应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法从mRNA及蛋白水平测定3组细胞中ALDH1A2水平变化,通过噻唑蓝(MTT)、Matrigel体外侵袭实验、平板克隆形成实验、黏附实验测定不同组别细胞增殖能力、侵袭
【机 构】
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450052郑州大学第一附属医院急诊外科,450052郑州大学第一附属医院胃肠外科,郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室
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目的 观察ALDH1A2基因过表达对LoVo细胞增殖、侵袭及黏附能力的影响.方法 将携带有人外源性ALDH1A2基因的真核表达质粒转染人结肠癌细胞株LoVo细胞,分别应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法从mRNA及蛋白水平测定3组细胞中ALDH1A2水平变化,通过噻唑蓝(MTT)、Matrigel体外侵袭实验、平板克隆形成实验、黏附实验测定不同组别细胞增殖能力、侵袭转移能力、克隆形成能力及黏附能力的变化.结果 RT-PCR及Western blot结果显示,与空质粒转染组及空白对照组细胞比较,转染pEGFP-N1-ALDH1A2的细胞其内源性ALDH1A2mRNA及蛋白表达水平显著增加(P＜0.05)；MTT及平板克隆实验显示转染pEGFP-N1-ALDH1A2质粒的LoVo增殖能力显著下降；Matrigel体外侵袭实验证实,转染pEGFP-N1 -ALDH1A2质粒的LoVo穿膜细胞数为(21.4±3.1)个,显著低于转染空质粒及空白组,LVo穿膜细胞数为(71.9±7.27、78.3 ±9.35)个,差异有统计学意义(P＜0.05),黏附实验结果显示,转染pEGFP-N1 -ALDH1A2质粒的LoVo黏附能力显著降低(P＜0.05),提示转染pSUPER-TF-1质粒的LoVo细胞侵袭、黏附能力显著下降.结论 ALDH1A2基因过表达可以明显降低LoVo细胞增殖能力、体外侵袭黏附能力。
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