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目的
探讨葫芦素I对HaCaT细胞体外增殖及角蛋白17(K17)、信号转导及转录激活子3(STAT3)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。
方法采用不同浓度葫芦素I(0.0125、0.025、0.05、0.1 μmol/L)、含与0.1 μmol/L葫芦素I等体积DMSO的DMEM培养液(溶媒组)、DMEM培养液(阴性对照组)、10 nmol/L卡泊三醇(阳性对照组)分别作用于HaCaT细胞。采用CCK8法检测葫芦素I作用12、24、36 h后对HaCaT细胞体外增殖的影响,RT-PCR法检测葫芦素I作用24 h对HaCaT细胞K17和VEGF mRNA表达的影响,Western印迹法检测葫芦素I作用24 h对HaCaT细胞K17、STAT3、磷酸化STAT3(P-STAT3)和VEGF蛋白表达的影响。
结果0.0125 μmol/L葫芦素I作用12 h即开始表现出对HaCaT细胞体外增殖的抑制作用,当葫芦素I浓度增加到0.1 μmol/L时,24 h和36 h的抑制率分别为43.00% ± 2.11%和48.98% ± 2.27%。与阴性对照组相比,各浓度葫芦素I组对HaCaT细胞体外增殖均有抑制作用(均P < 0.05),且该抑制作用随葫芦素I浓度的增加及作用时间的延长逐渐增强。不同浓度葫芦素I作用于HaCaT细胞24 h后,K17 mRNA及其蛋白、P-STAT3蛋白、VEGF mRNA及其蛋白表达量均随葫芦素I浓度的增加而降低,差异有统计学意义(均P < 0.05)。
结论葫芦素I可抑制HaCaT细胞的体外增殖,并可在mRNA水平下调K17、VEGF的表达,在蛋白水平下调K17、P-STAT3、VEGF的表达。