【摘 要】
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提取了扩展青霉Penicillium expansumTS414菌体的总RNA,并以反转录得到的cDNA为模板,成功扩增得到了脂肪酶基因;在此基础上,构建了重组表达载体pGEX-4T-1-PEL,并在大肠杆菌DH
【机 构】
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福建省尤溪县第一中学,福建师范大学生命科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（项目编号：81072616）,福建省自然科学基金计划资助项目（项目编号：2009J01125）.
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提取了扩展青霉Penicillium expansumTS414菌体的总RNA,并以反转录得到的cDNA为模板,成功扩增得到了脂肪酶基因;在此基础上,构建了重组表达载体pGEX-4T-1-PEL,并在大肠杆菌DH5α中实现了扩展青霉脂肪酶的表达;进一步采用低IPTG诱导浓度、低温、长时间的发酵策略等,使扩展青霉脂肪酶得以有活性的表达;同时,通过反复冻融细胞破碎法使其较好地从菌体细胞中分离出来,提取得到的酶液的活力达到0.49 U/mL.以上结果为后续脂肪酶分子进化等研究奠定了坚实的基础,亦可转化为高校或中
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