目的构建miRNA-146a真核表达质粒,探讨其在宫颈癌HeLa细胞株中的表达及对HeLa细胞恶性表型的影响。方法人工合成miRNA-146a基因序列,将miRNA-146a基因克隆到的真核表达载体pGeneSil-1中,构建成重组质粒pGeneSil-miR-146a。将miRNA-146a重组表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞株,通过荧光定量聚合酶链反应法(PCR)检测miRNA-146a在转录水平的表达。通过MTT法检测miRNA-146a对细胞增殖的影响,通过流式细胞术检测细胞周期的变化。结果经酶切和测序鉴定,证明重组质粒pGeneSil-miR-146a构建成功。重组质粒转染HeLa细胞后,荧光定量PCR证明能有效表达miRNA-146a。MTT检测结果显示转染miRNA-146a后的HeLa细胞活细胞数目明显增多。流式细胞术细胞周期检测结果表明转染miRNA-146a后的HeLa细胞S期细胞数明显增多。结论成功构建了miRNA-146a基因真核表达载体pGeneSil-miR-146a,转染宫颈癌HeLa细胞株后能有效表达miRNA-146a,miRNA-146a基因表达可以促进HeLa细胞的增殖。