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“跨界基因沉默”是一种利用大肠杆菌在哺乳动物细胞中传递小干扰RNA并引起基因沉默的新颖技 术,具有实用、稳定和低成本等优点.该技术通过构建一种能转录出短发夹RNA ( shRNA )的大肠杆菌,而这种大肠 杆菌产生的shRNA能靶向哺乳动物细胞中的特定基因,从而引发RNA干扰( RNA0 .本文用R e cA同源重组的方法 将跨界基因沉默质粒的工作元件快速地整合到大肠杆菌的染色体DNA上,构建了跨界基因沉默菌株.通过吖啶橙 染色实验证明了跨界基因沉默菌株能够入侵哺乳动物细胞,最后Western bl