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【摘要】 目的 探讨血浆肿瘤型丙酮酸激酶（TuM2-PK）含量变化与宫颈癌发生的关系及其对宫颈癌的诊断价值。
方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定30例正常人、35例慢性宫颈炎患者和32例宫颈癌患者血浆TuM2-PK水平，并以≥15 u/ml为阳性判断标准，以病理学为诊断金标准进行诊断试验。结果 宫颈癌组血浆TuM2-PK含量及阳性率均高于正常对照组、慢性宫颈炎组（P＜0.01）；正常对照组与慢性宫颈炎组的血浆TuM2-PK含量及阳性率差异均无统计学意义（P＞0.05）。血浆TuM2-PK检测宫颈癌的敏感度为84.4%，特异性为94.0%。结论 TuM2-PK是检测宫颈癌较为敏感的肿瘤标志物，具有较高的临床应用价值。
【关键词】 肿瘤标志物；肿瘤型丙酮酸激酶；宫颈癌
文章编号：1003-1383(2011)06-0703-03 中图分类号：R 711.74 文献标识码：A
doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2011.06.006
A study on TuM2 pyruvate kinase in plasma of patients with cervical
carcinoma and their clinical significance
HUANG Weitong，QIU Yun，HUANG Mingchun
（Maternal and ChildHealth Hospital of Nanning，Nanning，530011，China）
【Abstract】 Objective To explore the relationship between the change of TuM2-PK level in plasma and the occurrence of cervical carcinoma and to investigate its diagnostic value for cervical carcinoma.
Methods TuM2-PK levels of 30 normal people,of 35 patients with chronic cervitis,and of 32 cases with cervical carcinoma were tested by ELISA. The level ≥15 u/ml was taken as the criteria of positive judgment, with pathology as diagnosis standard to take the test.
Results Plasma TuM2-PK levels and positive rates of the cervical carcinoma group were higher than those of the normal group and the chronic cervicitis group（P＜0.01）.However, the comparison of Plasma TuM2-PK levels and positive rates between the cervical carcinoma group and the chronic cervicitis group did not show statistical difference（P＞0.05）.The sensitivity of Plasma TuM2-PK to test cervical carcinoma was 84.8% and the specificity was 94.0%.
Conclusion TuM2-PK is considered to be very sensitive tumor marker and has high clinical value.
【Key words】 tumor marker；tumor typeM2 pyruvate kinase；cervical carcinoma
宫颈癌是常见的妇科肿瘤，占女性生殖系统恶性肿瘤50%以上，发病率居全球妇女恶性肿瘤的第2位［1］。我国估计每年有近10万新发病例，约占全球新发病例总数的1/5，每年约有3万妇女死于宫颈癌。宫颈癌已成为继乳腺癌之后威胁妇女健康和生命的第二大杀手。随着筛查方法和技术不断改进，宫颈癌阳性发现率也逐渐提高。但是，年轻妇女宫颈癌的发病率仍处于上升的趋势，发病因素也很复杂，除了与病毒感染有关外，是否与人体组织相关的丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）表达有关系，至今文献报道甚少。肿瘤型丙酮酸激酶(tumor M2 pyruvate kinase,TuM2-PK)最早发现于肝癌细胞系中，其水平升高可见于多种肿瘤如胃肠道肿瘤、肺癌、神经内分泌肿瘤、肾细胞癌、胰腺癌、前列腺癌和甲状腺癌中，在恶性肿瘤的早期诊断及预后判断中显示出较好的应用前景［2~6］。本文通过检测宫颈癌患者血浆TuM2-PK水平，旨在探讨其在宫颈癌诊断中的临床价值。
资料与方法
1.研究对象 我院2009年至2011年住院或门诊就诊的宫颈病变患者67例，其中宫颈癌患者32例，年龄30～71岁，平均43.6岁，按1994年国际妇产科联盟FIGO分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期11例，Ⅲ期7例，Ⅳ期4例；慢性宫颈炎患者35例，年龄29～65岁，平均42.6岁。所有病例经病理确诊。30名正常对照为女性健康体检者，年龄22～56岁，平均年龄42.7岁。
2.检测方法 取受检者清晨空腹静脉血2 ml，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝处理（EDTA血浆中的TuM2-PK含量较血清受外界因素影响较小，重复性较好［7］）。1～2 h内3 000 r/min离心取样， -70℃冻存待检。肿瘤患者取样前均未经过任何抗肿瘤治疗，所有样本均无溶血、脂血。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血浆TuM2-PK水平，试剂盒购自德国ScheBoTech公司。实验操作严格按照试剂盒说明书进行。根据试剂盒所示以15 u/ml作为临界值，≥15 u/ml为阳性。
3.统计学处理 采用SPSS 11.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差（-±s）表示，采用t检验，计数资料的比较用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
结 果
1.三組血浆TuM2-PK含量比较 宫颈癌组血浆TuM2-PK含量与正常对照组、慢性宫颈炎组比较差异有统计学意义（P＜0.01），正常对照组和慢性宫颈炎组比较差异无统计学意义（P＞0.05），宫颈癌组含量较高。见表1。
2.三组血浆TuM2-PK阳性率比较 三组TuM2-PK阳性率比较差异有统计学意义（P＜0.01），正常对照组和慢性宫颈炎组的阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05），宫颈癌组阳性率较高。见表2。
3.TuM2-PK在宫颈癌诊断中的价值 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血浆TuM2-PK水平，以≥15 u/ml为阳性判断标准，以病理学为诊断金标准，结果血浆TuM2-PK检测宫颈癌的敏感度为84.4%，特异性为94.0%。见表3。
讨 论
肿瘤细胞中的丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）是糖酵解途径的一个关键酶，在三磷酸核苷的合成过程中起决定性作用。PK有4种不同的同工酶，分别为L型、R型、M1型、M2型，這4种同工酶的分布具有组织特异性。肿瘤发生时先表现为PK的组织特异性同工酶（如肌肉及脑中的M1-PK、肝及肾中的L-PK、红细胞中的R-PK等）表达减少，随之发生TuM2-PK同工酶的表达上调［8］，并在肿瘤细胞中呈过度表达。TuM2-PK作为一种新的肿瘤标志物最近才被提出来，通过检测血浆TuM2-PK水平有助于肿瘤的早期诊断、预后判断及疗效评估。本研究采用ELISA法测定宫颈癌患者血浆TuM2-PK水平，宫颈癌患者血浆TuM2-PK含量及阳性率明显高于正常对照组、慢性宫颈炎组，差异有统计学意义（P＜0.01）；正常对照组和慢性宫颈炎组的血浆TuM2-PK含量差异无统计学意义（P＞0.05）。说明宫颈癌患者血浆TuM2-PK含量变化与癌变有密切关系，而且含量越高，阳性率越高，在诊断试验中，其特异性为94.0%，敏感度为84.4%。因此，检测血浆中的TuM2-PK含量变化，有利于判断病情的发展和疗效动态观察，是诊断宫颈癌较为理想的指标，具有较高的临床应用价值。
参考文献
［1］Haie-Meder C,de Crevoisier R，Bruna A，et al. Concomitant chemoradiation in patients with cervix cancer［J］.Bull Cancer，2005，92（12）:1032-1038.
［2］Hathurusinghe HR,Goonetilleke KS,Siriwardena AK.Currentstatus of tumorM2 pyruvate kinase （tumorM2-PK） as a biomarker of gastrointestinal m alignancy［J］.Ann Surg Oncol,2007,14（10）:2714-2720.
［3］Weinnberger R, Appel B, Stein A,et al.The pyruvatekinase isoenzymeM2 （TuM2-PK） as a tumourmark-er for renal cell carcinoma［J］.Eur J Cancer Care,2007,16（4）:333-337.
［4］Staib P,Hoffmann M,Schinkōthe T. Plasma levels of tumorM2-pyruvate kinase should be used as a tumormarker for hematologicalm alignancies and solid tumors［J］.Clin Chem LabMed, 2006, 44（1）:28-31.
［5］VentrucciM,Cipolla A, Racchini C, et al.Tumor M2-pyruvate kinase,a newmetabolicmarker forpan-creatic cancer［J］.Dig Dis Sci，2004,49 （7-8）:1149-1155.
［6］Kaura B,BaggaR,Patel FD.Evaluation of the pyruvate kinase isoenzyme tumor （Tu M2-PK） as a tumor marker for cervical carcinoma［J］. J Obstet GynaecolRes,2004,30（3）:193-196.
［7］Hugo F,FischerG,Eigenbrodt E.Quantitative detec-tion of tumorM2-PK in serum and plasma［J］.Anticancer Res,1999,19（4A）:2753-2756.
［8］Mazurek S,Zwerschke W,Jansen-Dürr P，et al.Metabolic cooperation between different oncogenes during cell trans-formation: interaction between activated ras and HPV-16 E7［J］.Oncogene,2001,20（47）:6891-6898.
(收稿日期：2011-07-14 修回日期：2011-11-09)
(编辑：梁明佩 英文审校：梁 宇)
方法 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定30例正常人、35例慢性宫颈炎患者和32例宫颈癌患者血浆TuM2-PK水平，并以≥15 u/ml为阳性判断标准，以病理学为诊断金标准进行诊断试验。结果 宫颈癌组血浆TuM2-PK含量及阳性率均高于正常对照组、慢性宫颈炎组（P＜0.01）；正常对照组与慢性宫颈炎组的血浆TuM2-PK含量及阳性率差异均无统计学意义（P＞0.05）。血浆TuM2-PK检测宫颈癌的敏感度为84.4%，特异性为94.0%。结论 TuM2-PK是检测宫颈癌较为敏感的肿瘤标志物，具有较高的临床应用价值。
【关键词】 肿瘤标志物；肿瘤型丙酮酸激酶；宫颈癌
文章编号：1003-1383(2011)06-0703-03 中图分类号：R 711.74 文献标识码：A
doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2011.06.006
A study on TuM2 pyruvate kinase in plasma of patients with cervical
carcinoma and their clinical significance
HUANG Weitong，QIU Yun，HUANG Mingchun
（Maternal and ChildHealth Hospital of Nanning，Nanning，530011，China）
【Abstract】 Objective To explore the relationship between the change of TuM2-PK level in plasma and the occurrence of cervical carcinoma and to investigate its diagnostic value for cervical carcinoma.
Methods TuM2-PK levels of 30 normal people,of 35 patients with chronic cervitis,and of 32 cases with cervical carcinoma were tested by ELISA. The level ≥15 u/ml was taken as the criteria of positive judgment, with pathology as diagnosis standard to take the test.
Results Plasma TuM2-PK levels and positive rates of the cervical carcinoma group were higher than those of the normal group and the chronic cervicitis group（P＜0.01）.However, the comparison of Plasma TuM2-PK levels and positive rates between the cervical carcinoma group and the chronic cervicitis group did not show statistical difference（P＞0.05）.The sensitivity of Plasma TuM2-PK to test cervical carcinoma was 84.8% and the specificity was 94.0%.
Conclusion TuM2-PK is considered to be very sensitive tumor marker and has high clinical value.
【Key words】 tumor marker；tumor typeM2 pyruvate kinase；cervical carcinoma
宫颈癌是常见的妇科肿瘤，占女性生殖系统恶性肿瘤50%以上，发病率居全球妇女恶性肿瘤的第2位［1］。我国估计每年有近10万新发病例，约占全球新发病例总数的1/5，每年约有3万妇女死于宫颈癌。宫颈癌已成为继乳腺癌之后威胁妇女健康和生命的第二大杀手。随着筛查方法和技术不断改进，宫颈癌阳性发现率也逐渐提高。但是，年轻妇女宫颈癌的发病率仍处于上升的趋势，发病因素也很复杂，除了与病毒感染有关外，是否与人体组织相关的丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）表达有关系，至今文献报道甚少。肿瘤型丙酮酸激酶(tumor M2 pyruvate kinase,TuM2-PK)最早发现于肝癌细胞系中，其水平升高可见于多种肿瘤如胃肠道肿瘤、肺癌、神经内分泌肿瘤、肾细胞癌、胰腺癌、前列腺癌和甲状腺癌中，在恶性肿瘤的早期诊断及预后判断中显示出较好的应用前景［2~6］。本文通过检测宫颈癌患者血浆TuM2-PK水平，旨在探讨其在宫颈癌诊断中的临床价值。
资料与方法
1.研究对象 我院2009年至2011年住院或门诊就诊的宫颈病变患者67例，其中宫颈癌患者32例，年龄30～71岁，平均43.6岁，按1994年国际妇产科联盟FIGO分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期11例，Ⅲ期7例，Ⅳ期4例；慢性宫颈炎患者35例，年龄29～65岁，平均42.6岁。所有病例经病理确诊。30名正常对照为女性健康体检者，年龄22～56岁，平均年龄42.7岁。
2.检测方法 取受检者清晨空腹静脉血2 ml，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝处理（EDTA血浆中的TuM2-PK含量较血清受外界因素影响较小，重复性较好［7］）。1～2 h内3 000 r/min离心取样， -70℃冻存待检。肿瘤患者取样前均未经过任何抗肿瘤治疗，所有样本均无溶血、脂血。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血浆TuM2-PK水平，试剂盒购自德国ScheBoTech公司。实验操作严格按照试剂盒说明书进行。根据试剂盒所示以15 u/ml作为临界值，≥15 u/ml为阳性。
3.统计学处理 采用SPSS 11.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差（-±s）表示，采用t检验，计数资料的比较用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
结 果
1.三組血浆TuM2-PK含量比较 宫颈癌组血浆TuM2-PK含量与正常对照组、慢性宫颈炎组比较差异有统计学意义（P＜0.01），正常对照组和慢性宫颈炎组比较差异无统计学意义（P＞0.05），宫颈癌组含量较高。见表1。
2.三组血浆TuM2-PK阳性率比较 三组TuM2-PK阳性率比较差异有统计学意义（P＜0.01），正常对照组和慢性宫颈炎组的阳性率比较差异无统计学意义（P＞0.05），宫颈癌组阳性率较高。见表2。
3.TuM2-PK在宫颈癌诊断中的价值 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血浆TuM2-PK水平，以≥15 u/ml为阳性判断标准，以病理学为诊断金标准，结果血浆TuM2-PK检测宫颈癌的敏感度为84.4%，特异性为94.0%。见表3。
讨 论
肿瘤细胞中的丙酮酸激酶（pyruvate kinase，PK）是糖酵解途径的一个关键酶，在三磷酸核苷的合成过程中起决定性作用。PK有4种不同的同工酶，分别为L型、R型、M1型、M2型，這4种同工酶的分布具有组织特异性。肿瘤发生时先表现为PK的组织特异性同工酶（如肌肉及脑中的M1-PK、肝及肾中的L-PK、红细胞中的R-PK等）表达减少，随之发生TuM2-PK同工酶的表达上调［8］，并在肿瘤细胞中呈过度表达。TuM2-PK作为一种新的肿瘤标志物最近才被提出来，通过检测血浆TuM2-PK水平有助于肿瘤的早期诊断、预后判断及疗效评估。本研究采用ELISA法测定宫颈癌患者血浆TuM2-PK水平，宫颈癌患者血浆TuM2-PK含量及阳性率明显高于正常对照组、慢性宫颈炎组，差异有统计学意义（P＜0.01）；正常对照组和慢性宫颈炎组的血浆TuM2-PK含量差异无统计学意义（P＞0.05）。说明宫颈癌患者血浆TuM2-PK含量变化与癌变有密切关系，而且含量越高，阳性率越高，在诊断试验中，其特异性为94.0%，敏感度为84.4%。因此，检测血浆中的TuM2-PK含量变化，有利于判断病情的发展和疗效动态观察，是诊断宫颈癌较为理想的指标，具有较高的临床应用价值。
参考文献
［1］Haie-Meder C,de Crevoisier R，Bruna A，et al. Concomitant chemoradiation in patients with cervix cancer［J］.Bull Cancer，2005，92（12）:1032-1038.
［2］Hathurusinghe HR,Goonetilleke KS,Siriwardena AK.Currentstatus of tumorM2 pyruvate kinase （tumorM2-PK） as a biomarker of gastrointestinal m alignancy［J］.Ann Surg Oncol,2007,14（10）:2714-2720.
［3］Weinnberger R, Appel B, Stein A,et al.The pyruvatekinase isoenzymeM2 （TuM2-PK） as a tumourmark-er for renal cell carcinoma［J］.Eur J Cancer Care,2007,16（4）:333-337.
［4］Staib P,Hoffmann M,Schinkōthe T. Plasma levels of tumorM2-pyruvate kinase should be used as a tumormarker for hematologicalm alignancies and solid tumors［J］.Clin Chem LabMed, 2006, 44（1）:28-31.
［5］VentrucciM,Cipolla A, Racchini C, et al.Tumor M2-pyruvate kinase,a newmetabolicmarker forpan-creatic cancer［J］.Dig Dis Sci，2004,49 （7-8）:1149-1155.
［6］Kaura B,BaggaR,Patel FD.Evaluation of the pyruvate kinase isoenzyme tumor （Tu M2-PK） as a tumor marker for cervical carcinoma［J］. J Obstet GynaecolRes,2004,30（3）:193-196.
［7］Hugo F,FischerG,Eigenbrodt E.Quantitative detec-tion of tumorM2-PK in serum and plasma［J］.Anticancer Res,1999,19（4A）:2753-2756.
［8］Mazurek S,Zwerschke W,Jansen-Dürr P，et al.Metabolic cooperation between different oncogenes during cell trans-formation: interaction between activated ras and HPV-16 E7［J］.Oncogene,2001,20（47）:6891-6898.
(收稿日期：2011-07-14 修回日期：2011-11-09)
(编辑：梁明佩 英文审校：梁 宇)