【摘 要】
：
目的构建人干扰素λ1(interferonλ1,IFNλ1)基因启动子荧光素酶报告基因载体,并探讨仙台病毒及质粒IRF3-5D和HA-IRF7对其转录活性的影响。方法提取BEAS-2B细胞基因组DNA,以
【机 构】
：
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;
论文部分内容阅读
目的构建人干扰素λ1(interferonλ1,IFNλ1)基因启动子荧光素酶报告基因载体,并探讨仙台病毒及质粒IRF3-5D和HA-IRF7对其转录活性的影响。方法提取BEAS-2B细胞基因组DNA,以其为模板,PCR扩增IFNλ1基因启动子,插入荧光素酶报告基因载体pGL3-enhancer,构建IFNλ1基因启动子荧光素酶报告基因质粒IFNL1-luc,将其转染293T细胞,同时用质粒IFNβ-luc和pGL3-enhancer转染作为对照。转染24 h后感染仙台病毒,于感染前和感染后4、12、18和24 h收集细胞,进行双荧光素酶活性检测;用质粒IRF3-5D或HA-IRF7与质粒IFNL1-luc共转染,36 h后收集细胞,进行双荧光素酶活性检测。结果 IFNλ1基因启动子荧光素酶报告基因质粒IFNL1-luc经双酶切及测序鉴定,证明构建正确;分别转染质粒IFNL1-luc和IFNβ-luc的细胞感染仙台病毒后,荧光素酶活性倍数均随时间延长呈明显上升趋势,至18 h达到峰值(分别为1 000倍和2 300倍),转染质粒pGL3-enhancer的细胞感染仙台病毒后,不同时间点收集的细胞,荧光素酶活性倍数一直处于较低水平;质粒HA-IRF7或IRF3-5D对IFNL1-luc的活化倍数明显高于pGL3-enhancer(P<0.05)。结论成功构建了IFNλ1基因启动子荧光素酶报告基因质粒IFNL1-luc,仙台病毒及质粒IRF3-5D和HA-IRF7均能激活IFNL1-luc的转录,为进一步研究调控IFNλ1表达的信号转导通路奠定了基础。
其他文献
随着催化动力学光度法的快速发展,利用该法对痕量钒(Ⅴ)的测定也得到广泛应用。以不同的有机染料为线索,综述了近二十年来国内外催化动力学光度法测定痕量钒(Ⅴ)的研究进展。
为把握"十三五"国际旅游岛和"一带一路"发展战略机遇期,凝练土地税收效益,带动开放竞争实力提升,实现2020年双"60%"比重目标,走"产业前沿、格局集聚、腾笼换鸟、楼宇强省"的
目的:探讨不同中医证型寻常型银屑病的发病危险因素,为其防治提供客观理论依据。方法:采用多中心病例-对照回顾性调查,对479例不同中医证型寻常型银屑病患者和479例正常人的
<正>紫外线对皮肤伤害太阳光中由γ射线、X射线、紫外线、可见光线和红外线组成。由于γ线和X线的能量低,受臭氧层的阻隔达不到地面。紫外线光在200-400nm,可见光波长在400-
采样设计是土壤有机碳研究中面临的首要问题。论文对黄土高原不同地貌类型区农田土壤有机碳进行抽样样本代表性评价,对比分析了不同采样方法的样点布设效率,结果表明:1)高塬
介绍球铁冷却、凝固过程中的体积变化以及型腔尺寸变化。分析、并用实例证明球铁件无冒口铸造的可行性及条件。指出无冒口铸造决不是无补缩铸造,强调采用高碳当量、高刚度铸
目的:筛选乳腺癌相关抗原。方法:提取乳腺癌T-47D细胞株总蛋白,采用双向电泳技术进行分离后转膜,分别采用乳腺癌患者血清和对照血清作为一抗进行Western blot分析,比较杂交蛋
近年来,随着全球经济飞跃发展,全球经济一体化,国家和个人收入差距进一步加大,帕累托法则对于分析社会经济现象显示出重要的地位。本文基于帕累托法则在经济现象中的表现形式
文章介绍了蒸发冷却器的原理,并以某电厂2×350MW间接空冷机组设计为例,对蒸发冷却器和机械通风湿冷塔进行了技术经济比较。结果表明,蒸发式冷却器与机械通风湿冷塔相比,具有
<正> 关于经济法的本质在经济法学中始终是一个最根本的基本理论问题。也正因为此,经济法学者从经济法产生起就对其进行了诸多研究,形成了许多关于经济法本质的观点。从经济