目的活性氧簇(reactiveoxygenspecies,ROS)升高是癌症转移的主要原因之一,ROS已成为一种新的抗癌靶点,但其形成机制尚未完全阐明。本研究以佛波酯(phorbol12myristate13acetate,PMA)诱导Hela细胞ROS升高为模型,探讨Hela细胞ROS升高的相关机制。方法 500ng/mL的PMA诱导Hela细胞0.5h,荧光酶标仪检测Hela细胞经过PMA诱导后的ROS产量,蛋白质印迹法检测Hela细胞经过PMA诱导后的HIF1α、Rac2和NOX2蛋白的表达量。结果 500ng/mLPMA诱导Hela细胞0.5、1、2和4h,与空白对照组比较,犘值分别为<0.001、0.055、0.125和0.135,表明0.5h为PMA诱导Hela细胞ROS升高的最佳诱导条件。500ng/mLPMA诱导Hela细胞0.5h后,诱导组中HIF1α、Rac2和NOX2蛋白条带灰度平均值分别为15833.33±63.13、20448.33±78.65和21840.33±123.91,均高于空白组的9853.33±124.13、9782.00±93.62和10638.33±106.57,均犘<0.001,表明PMA诱导了HIF1α、Rac2和NOX2蛋白的高表达。荧光酶标仪检测Hela细胞ROS结果显示,echinomycin组、NSC23766组和DPI组与PMA组比较,犘值分别为<0.001、0.003和<0.001,表明HIF1α、Rac2和NOX2抑制剂均抑制了Hela细胞中PMA诱导的ROS升高。蛋白质印迹法检测结果显示,空白组HIF1α、Rac2和NOX2灰度平均值分别为13571.00±287.68、10495.67±253.72和17403.33±162.87,PMA组分别为22946.33±67.10、30578.67±251.11和30582.00±88.39,NSC23766组分别为22629.67±445.26、3919.00±41.68和22618.67±161.51,echinomycin组分别为16691.33±9.504、15424.00±315.05和14899.00±71.55,DPI组分别为22970.00±714.88、30120.33±555.05和5787.00±12.29。echinomycin组与PMA组比较,均犘<0.001,表明echinomycin抑制了PMA诱导的HIF1α、Rac2和NOX2蛋白的高表达;NSC23766组与PMA组比较,犘值分别为0.354、<0.001和<0.001,表明NSC23766抑制了PMA诱导的Rac2和NOX2蛋白的高表达,但没有抑制HIF1α蛋白的高表达;DPI组与PMA组比较,犘值分别为0.944、0.117和<0.001,表明DPI抑制了PMA诱导的NOX2蛋白的高表达,但没有抑制HIF1α和Rac2蛋白的高表达。结论 PMA能引起Hela细胞ROS升高,该现象依赖HIF1α/Rac2/NOX2途径。这可能为阐明与ROS升高相关的癌症转移分子机制、干预癌症转移的靶向治疗分子研究提供思路。