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摘 要：【方法】采用间接ELISA方法，对采自23个规模场户的419份血清，进行PRRSV变异株疫苗免疫抗体检测。【结果】17个场户免疫抗体合格率在70 %以上，平均合格率为79.71 %，其中种猪为90.52 %、保育猪为80.17 %，育肥猪为70.48 %；11个灭活疫苗免疫场户中有6个场户免疫抗体合格率在70 %以上，平均抗体合格率为71.48 %，12个弱毒疫苗免疫场户中有10个场户免疫抗体合格率在70 %以上，平均抗体合格率为87.55 %。【结论】灭活疫苗免疫种猪、保育猪和育肥猪抗体合格率存在明显差异，弱毒疫苗免疫种猪和保育猪与育肥猪抗体合格率之间存在明显差异。
关键词：PRRSV变异株；免疫抗体；间接ELISA
中图分类号：S855.3 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2016）10-0030-03
高致病性猪蓝耳病是由缺失Nsp2基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种以持续高热、高发病率和高死亡率为特征的疫病。2006年国内首次发生。2007年，我省猪群中猪繁殖与呼吸综合征变异株病毒感染率为0.54 %，血清抗体阳性率为42.83 %[1]。此后，有关我省猪PRRSV变异株疫苗免疫效果免疫调查情况除兰州市有报道外，全省鲜有报道。为了解当前甘肃省规模养猪场户PRRSV变异株疫苗免疫效果，我们选择中小规模养猪比较集中的23个养殖场户进行了免疫抗体检测，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 样品采集
随机选择全省12个市州的采用PRRSV变异株疫苗免疫30 d以上的23个规模养殖场采集种猪、保育猪和肥育猪并分离血清。共采集种猪8场114份，保育猪6场116份，肥育猪9场166份共计419份血清样品。
1.2 检测方法与结果判定
1.2.1 间接ELISA，按试剂说明书操作
1.2.2 结果判定
阳性对照OD630 nm≥0.7，阴性对照OD630 nm<0.3时试验成立，计算KQ值。
KQ=（样品OD630 nm值/阳性对照OD630 nm平均值）×100
当KQ≥20，判定为抗体阳性及免疫合格；KQ<20，判定为抗体阴性。
1.3 试剂来源
ELISA试剂盒购自武汉科动物生物制品有限责任公司，批号：150101。
1.4 疫苗来源
弱毒疫苗主要来源于哈尔滨维科生物技术开发公司、天津辉瑞生物制品有限公司、上海海利生物制品有限公司、吉林正业生物制品有限公司4家，灭活疫苗主要来源于洛阳普莱柯生物工程有限公司、齐鲁动物保健品有限公司、中牧实业股份有限公司成都药械厂，瑞普（保定）生物药业有限公司4家。
2 检测结果（表1）
（1） 共检测23个规模养猪场户血清419份（种猪8场137份，保育猪6场116份，肥育猪9场166份）。其中检测灭活疫苗免疫场户11个202份，抗体合格144份，平均合格率为71.28 %；检测弱毒疫苗免疫场户12个217份，抗体合格190份，平均合格率为87.56 %。
（2） 11个灭活疫苗免疫场户中6个场户免疫抗体合格率在70 %以上，群体免疫合格率为 54.55 %，种猪、保育猪和育肥猪合格率分别为89.53 %、60.71 %和55 %；12个弱毒疫苗免疫场户中有10个场户免疫抗体合格率在70 %以上，群体免疫合格率为83.33 %，种猪、保育猪和育肥猪合格率分别为92.16 %、91.67 %和79.25 %；各场检测结果详见附表。
3 小结与讨论
（1） 本次调查表明，规模场户群体和个体免疫效果均是弱毒苗明显好于灭活苗。本次共检测23个规模场户，其中弱毒疫苗免疫场户12个，灭活疫苗免疫场户11个，共有17个场户免疫抗体合格率达到70 %以上，其中弱毒疫苗免疫场户10个，灭活苗免疫场户7个。弱毒疫苗免疫场户群体和个体免疫合格率分别为83.33 %和87.55 %。灭活疫苗免疫场户群体和个体免疫合格率分别为54.55 %和71.48 %。无论是群体还是个体，免疫合格率均是弱毒苗明显高于灭活苗。
（2） 统计检测结果发现，无论是灭活疫苗还是弱毒疫苗，种猪免疫效果均明显好于保育猪和育肥猪。本次检测种猪灭活疫苗和弱毒疫苗免疫抗体合格率分别为89.53 %和92.16 %，两者相差仅2.63 %。而保育猪和育肥猪灭活疫苗免疫抗体合格率与种猪相比，相差近20 %或以上；保育猪弱毒疫苗免疫抗体合格率91.67 %，与种猪抗体合格率92.16 %无明显差异。而种猪与育肥猪抗体合格率79.25 %相差12.91 %；这与规模猪场重视种猪免疫和种猪多次免疫有关。保育猪弱毒疫苗效果好还与PRRSV免疫母源抗体存留时间长有关。
（3） 本次调查通过对各场检测结果和比较各场使用不同类型疫苗情况分析，未发现不同厂家生产的弱毒疫苗和灭活疫苗，在使用相同免疫剂量的情况下，其效果存在明显差异，且免疫安全性均较好。
（4） PRRSV经典株和变异株弱毒疫苗多用于感染压力大的猪场和仔猪使用，病毒阴性猪场和种猪特别是在妊娠期的母猪不提倡使用。灭活疫苗主要用于预防后备母猪和经产母猪感染PRRS所造成的繁殖障碍[2]。因此，各场应根据当地PRRS两种毒株疫情风险和场内是否存在两种毒株的隐性感染决定选用何种疫苗。当前我省的规模猪场几乎都是PRRSV阳性场，因此使用PRRS变异株和经典株对猪群进行免疫注射免疫预防的必须措施，同时有针对性的开展两种毒株流行病学调查和疫苗免疫效果评价，寻找切合自身场户的科学免疫程序及实施综合防控措施才是预防和控制该病的重要手段。□□
参考文献：
[1] 韩庆彦，宋建国，周 峰，等. 甘肃省高致病性猪繁殖与呼吸综合征分布调查[J].动物医学进展，2012，11（6）：140-142.
[2] 陈弟诗，李金海，邓永强，等.猪繁殖与呼吸综合征免疫的重重疑云[J].猪业科学，2012（12）：92-94.
关键词：PRRSV变异株；免疫抗体；间接ELISA
中图分类号：S855.3 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2016）10-0030-03
高致病性猪蓝耳病是由缺失Nsp2基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的一种以持续高热、高发病率和高死亡率为特征的疫病。2006年国内首次发生。2007年，我省猪群中猪繁殖与呼吸综合征变异株病毒感染率为0.54 %，血清抗体阳性率为42.83 %[1]。此后，有关我省猪PRRSV变异株疫苗免疫效果免疫调查情况除兰州市有报道外，全省鲜有报道。为了解当前甘肃省规模养猪场户PRRSV变异株疫苗免疫效果，我们选择中小规模养猪比较集中的23个养殖场户进行了免疫抗体检测，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 样品采集
随机选择全省12个市州的采用PRRSV变异株疫苗免疫30 d以上的23个规模养殖场采集种猪、保育猪和肥育猪并分离血清。共采集种猪8场114份，保育猪6场116份，肥育猪9场166份共计419份血清样品。
1.2 检测方法与结果判定
1.2.1 间接ELISA，按试剂说明书操作
1.2.2 结果判定
阳性对照OD630 nm≥0.7，阴性对照OD630 nm<0.3时试验成立，计算KQ值。
KQ=（样品OD630 nm值/阳性对照OD630 nm平均值）×100
当KQ≥20，判定为抗体阳性及免疫合格；KQ<20，判定为抗体阴性。
1.3 试剂来源
ELISA试剂盒购自武汉科动物生物制品有限责任公司，批号：150101。
1.4 疫苗来源
弱毒疫苗主要来源于哈尔滨维科生物技术开发公司、天津辉瑞生物制品有限公司、上海海利生物制品有限公司、吉林正业生物制品有限公司4家，灭活疫苗主要来源于洛阳普莱柯生物工程有限公司、齐鲁动物保健品有限公司、中牧实业股份有限公司成都药械厂，瑞普（保定）生物药业有限公司4家。
2 检测结果（表1）
（1） 共检测23个规模养猪场户血清419份（种猪8场137份，保育猪6场116份，肥育猪9场166份）。其中检测灭活疫苗免疫场户11个202份，抗体合格144份，平均合格率为71.28 %；检测弱毒疫苗免疫场户12个217份，抗体合格190份，平均合格率为87.56 %。
（2） 11个灭活疫苗免疫场户中6个场户免疫抗体合格率在70 %以上，群体免疫合格率为 54.55 %，种猪、保育猪和育肥猪合格率分别为89.53 %、60.71 %和55 %；12个弱毒疫苗免疫场户中有10个场户免疫抗体合格率在70 %以上，群体免疫合格率为83.33 %，种猪、保育猪和育肥猪合格率分别为92.16 %、91.67 %和79.25 %；各场检测结果详见附表。
3 小结与讨论
（1） 本次调查表明，规模场户群体和个体免疫效果均是弱毒苗明显好于灭活苗。本次共检测23个规模场户，其中弱毒疫苗免疫场户12个，灭活疫苗免疫场户11个，共有17个场户免疫抗体合格率达到70 %以上，其中弱毒疫苗免疫场户10个，灭活苗免疫场户7个。弱毒疫苗免疫场户群体和个体免疫合格率分别为83.33 %和87.55 %。灭活疫苗免疫场户群体和个体免疫合格率分别为54.55 %和71.48 %。无论是群体还是个体，免疫合格率均是弱毒苗明显高于灭活苗。
（2） 统计检测结果发现，无论是灭活疫苗还是弱毒疫苗，种猪免疫效果均明显好于保育猪和育肥猪。本次检测种猪灭活疫苗和弱毒疫苗免疫抗体合格率分别为89.53 %和92.16 %，两者相差仅2.63 %。而保育猪和育肥猪灭活疫苗免疫抗体合格率与种猪相比，相差近20 %或以上；保育猪弱毒疫苗免疫抗体合格率91.67 %，与种猪抗体合格率92.16 %无明显差异。而种猪与育肥猪抗体合格率79.25 %相差12.91 %；这与规模猪场重视种猪免疫和种猪多次免疫有关。保育猪弱毒疫苗效果好还与PRRSV免疫母源抗体存留时间长有关。
（3） 本次调查通过对各场检测结果和比较各场使用不同类型疫苗情况分析，未发现不同厂家生产的弱毒疫苗和灭活疫苗，在使用相同免疫剂量的情况下，其效果存在明显差异，且免疫安全性均较好。
（4） PRRSV经典株和变异株弱毒疫苗多用于感染压力大的猪场和仔猪使用，病毒阴性猪场和种猪特别是在妊娠期的母猪不提倡使用。灭活疫苗主要用于预防后备母猪和经产母猪感染PRRS所造成的繁殖障碍[2]。因此，各场应根据当地PRRS两种毒株疫情风险和场内是否存在两种毒株的隐性感染决定选用何种疫苗。当前我省的规模猪场几乎都是PRRSV阳性场，因此使用PRRS变异株和经典株对猪群进行免疫注射免疫预防的必须措施，同时有针对性的开展两种毒株流行病学调查和疫苗免疫效果评价，寻找切合自身场户的科学免疫程序及实施综合防控措施才是预防和控制该病的重要手段。□□
参考文献：
[1] 韩庆彦，宋建国，周 峰，等. 甘肃省高致病性猪繁殖与呼吸综合征分布调查[J].动物医学进展，2012，11（6）：140-142.
[2] 陈弟诗，李金海，邓永强，等.猪繁殖与呼吸综合征免疫的重重疑云[J].猪业科学，2012（12）：92-94.