目的利用双向凝胶电泳和质谱分析对辅助治疗期大肠癌脾气虚证、胃阴虚证、平和证型患者血清蛋白质组进行分析,探索同一疾病不同证候的血清蛋白质表达差异。方法选取辅助治疗期大肠癌脾气虚证、胃阴虚证患者各8例,以大肠癌平和证型患者6例作为对照组,采集清晨空腹血清标本,通过亲和层析法去除血清高丰度白蛋白和免疫球蛋白,运用Cy Dye荧光染料进行标记,并设立内标,上样于同一胶中进行双向凝胶电泳分离,电泳结束后分别用488 nm、530 nm、633 nm波长激光激发扫描获得不同样品的蛋白质组图谱,所得蛋白质图谱应用De Cyder 6.5软件进行分析,选择蛋白质表达水平上升或下降120%以上的差异蛋白质进行质谱鉴定及生物信息学分析。结果在大肠癌辅助治疗期不同证候中筛选出13个表达有显著差异的蛋白质,其中7个蛋白质被确定:血红素前体、α-1-B-糖蛋白、色氨酸羟化酶-1、结合珠蛋白在胃阴虚证、脾气虚证患者血清中表达均上调,而富含亮氨酸的α-2-糖蛋白-1表达均下调。胰蛋白酶抑制剂HI30、转甲状腺素蛋白在胃阴虚证患者中表达上调,但在脾气虚证患者中表达无显著差异。结论大肠癌辅助治疗期脾气虚证、胃阴虚证形成存在不同的分子基础,可以作为辨证论治的潜在客观指标,胃阴虚证的产生可能与胰蛋白酶抑制剂HI30、转甲状腺素蛋白上调有关。