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目的：分离纯化肝细胞HepG2与免疫细胞U937分泌的高迁移率族蛋白1（high mobility group box-1 protein,HMGB1）,并加以鉴定。方法：体外培养人肝细胞HepG2与免疫细胞U937,采用400 ng/mL的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激20 h后收集细胞培养液上清。采用超滤浓缩,阳离子交换层析,阴离子交换层析,Sephadex G75凝胶过滤层析结合免疫沉淀的方法,进行分离纯化;聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及Western印迹进行蛋