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[目的] 设计一种能够快速检测出牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)的方法.[方法] 依据GenBank公布的B V D V 5′U T R基因属于特异性保守区域的前提,构建具有特异性的探针和引物,以体外转录病毒RNA作为绝对定量标准品.对荧光定量RT-PCR方法的各反应条件进行优化,创建BVDV荧光定量PCR检测方法.[结果] 5.0267 copies·μL?1是此检测方法的最低下限值,该方法拥有良好的重复性,变异系数在组内、组间均<1％.特异性较高,对其他病毒核酸的扩增均为阴性,如猪瘟病毒、口蹄疫病毒等.[结论] 建立的BVDV荧光定量PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,为牛病毒性腹泻的早期诊断提供了重要的技术支撑.