胰岛素样生长因子Ⅱ对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1一氧化氮合酶基因表达的影响

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目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)调节成骨细胞一氧化氮(NO)水平及诱导型(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA转录的作用.方法不同浓度和不同时间IGF-Ⅱ作用于小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1细胞后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖、硝酸还原酶法测定细胞培养物上清NO浓度、逆转录聚合酶链式反应检测细胞的iNOS和eNOS mRNA转录水平.结果1 μg/L IGF-Ⅱ作用72 h,10和100 μg/L IGF-Ⅱ分别作用24 、48和72 h MC3T3-E1细胞,其MTT值均明显升高(P<0.05、P<0.01).100 μg/L IGF-Ⅱ分别作用48和72 h,细胞iNOS mRNA水平及其上清液中NO水平均显著下降(P<0.01),但IGF-Ⅱ以不同浓度及时间作用的细胞eNOS mRNA水平均无明显改变(P>0.05).结论 1 ~100 μg/L IGF-Ⅱ均能促进MC3T3-E1细胞增殖,此作用可能与IGF-Ⅱ维持细胞低水平NO有关.较高浓度的IGF-Ⅱ(100 μg/L)可在转录水平上下调MC3T3-E1细胞iNOS 基因表达,但不影响eNOS mRNA的转录,这可能是MC3T3-E1细胞维持低水平NO的机制之一。

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