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目的在原核表达系统中对HCV E1基因进行克隆和高效表达，并初步探讨表达产物在抗-HCV筛选中的作用。方法通过RT-PCR法从HCV RNA阳性的血清标本中扩增出HCV EI片段，并在扩增用的引物中引入克隆所需的酶切位点，克隆产物经Xba I和EeoR I酶切后，在T4DNA连接酶的作用下克降入经同样双酶切的原核表达载体PMS-31b中，并用此连接产物转化大肠埃希菌POP2136，挑取具有氨苄抗性的菌落扩大培养后提取质粒进行酶切鉴定，鉴定出的阳性菌经42℃诱导后用SDS-PAGE检查其表达状况，并用Western blot鉴定表达产物的特异性，同时用初步纯化的表达产物用ELISA法检测病人血清。结果经Sma I酶切后PCR产物被切成144 bp和356 bp的两个片段，在具有氨苄抗性的菌中提取的质粒经Sma I和Xba I酶切后产生了一356 bp的片段；42℃诱导后在SDS-PAGE中出现了一条相对分子质量为31 000的条带，其表达量约为17％，经West-ern blot鉴定后在该处出现了阳性信号；ELISA实验显示在抗HCV阳性的血清中的阳性率约为29.8％(26/90)，而在抗HCV阴性的血清中其阳性率约为3.9％(3/76)。结论通过RT-PCR方法将HCV E1基因从HCV RNA阳性的血清标本中调出，构建了HCV E1的原核表达载体-PMS-E1，其表达量为17％，表达产物具有良好的特异性，有望应用于抗HCV的检测中。