汉滩病毒M片段噬菌体表位文库的构建及筛选

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cclone
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目的 通过构建汉滩病毒M片段的噬菌体展示文库,筛选汉滩病毒包膜蛋白的抗原表位.方法 DNase Ⅰ随机消化的M片段与载体pComb3连接,转化宿主XL-1Blue,在辅助噬菌体VCSM13存在的条件下,获得M片段的随机噬菌体文库.利用纯化的恢复期病人血清对M片段噬菌体文库进行3轮淘洗,通过ELISA、序列分析对所获得的克隆进行鉴定.并对其中2个阳性克隆的目的 片段进行了原核表达和免疫原性分析.结果 筛选获得的5个阳性噬菌体克隆均位于G1蛋白编码区,原核表达的2个阳性克隆片段蛋白免疫兔,免疫兔血清能与病毒抗原发生特异反应.结论 本技术路线可用于汉滩病毒包膜蛋白抗原表位的研究,为汉滩病毒诊断试剂的研制、亚单位疫苗的设计提供了数据。

其他文献
目的 评价全直肠系膜切除(TME)、双吻合器在低位直肠癌保肛手术中的应用.方法回顾性分析92例采用直肠全系膜切除、双吻合器行低位直肠癌前切除术患者临床资料.结果术后发生吻合口漏3例(3.3%),吻合口狭窄5例(5.4%).术后随访1~5年,局部复发6例(6.5%).结论低位直肠癌全直肠系膜切除能降低局部复发,而双吻合器的应用能提高低位直肠癌的保肛率。