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目的:评价取卵日连续2次取精而减少ICSI特别是经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)/睾丸细针抽吸术(TESE)周期数在辅助生殖技术中的应用效果。方法:收集取卵日连续2次射精的精液样本(34例68份)。比较前后2次取出的精液分析参数,总结2次精液处理后混合用于授精的实验室结果和临床妊娠结局。结果:34例男性均在4 h内连续手淫取出2次精液。第1和第2次射精时间间隔[94.9±39.8(26~183)]m in。第1次射出精液的量[(2.0±1.4)m l]显著高于第2次射出的量[(1.5±0.9)m l](P=0.007),而第1次射出精液的精子活动率和a+b级精子百分率[(40.8±25.3)%、(30.9±22.4)%]显著低于第2次的[(52.2±21.1)%、(39.9±17.5)%](P<0.05);但是2次取出精液的精子浓度和精子总计数比较差异无统计学意义(P>0.05)。34例男性的精液处理后行IVF、ICSI和IVF+ICSI周期分别为28、3、3。其中IVF、ICSI、IVF+ICSI周期的平均获卵数、正常受精率、优质胚胎率、冷冻周期数/新鲜移植周期数分别为15.5±8.7、57.0%(247/433)、58.7%(145/247)、20/24;21.7±8.3、61.5%(40/65)、67.5%(27/40)、3/2;10.0±2.6、72.4%(21/29)、66.7%(14/21)、3/3。新鲜胚胎移植临床妊娠率和冷冻胚胎冻融移植(FET)临床妊娠率分别为34.5%、30.7%。在妊娠例数中14例活产6男9女的健康小孩。结论:取卵日连续2次取精以收集更多数量和/或活动力更好的精子用于辅助生殖技术中可以获得30%以上的临床妊娠率,也可以避免微创取精术和其他不必要的显微受精方式。