人白细胞介素18的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zongduzhicai

【摘要】

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目的在大肠杆菌中高效表达IL-18.方法从人外周血中提取RNA,用RT-PCR方法得到IL-18的cDNA,双酶切将其插入pET-23(b)+载体中,转化大肠杆菌DH5α.筛选阳性菌落,提取质粒,转化大

【作者】

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赵春艳赵宝昌

【机构】

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大连医科大学基础医学院生物化学及分子生物学教研室

【出处】

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中国生物制品学杂志

【发表日期】

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2003年1期

【关键词】

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人白细胞介素18 基因克隆大肠杆菌表达 Interleukin Gene cloning DNA sequence

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目的在大肠杆菌中高效表达IL-18.方法从人外周血中提取RNA,用RT-PCR方法得到IL-18的cDNA,双酶切将其插入pET-23(b)+载体中,转化大肠杆菌DH5α.筛选阳性菌落,提取质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.结果所获得人IL-18克隆,经测序与GenBank报道的完全一致.所表达的产物经SDS-PAGE显示在相对分子质量20 000处出现一条特殊条带,与预期的分子量一致.结论已成功获得了人IL-18克隆并在大肠杆菌中表达.

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