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目的
探讨吡斯的明(PYR)对人心肌成纤维细胞(HCF)增殖、Ⅰ型胶原纤维(COL1)表达及增殖信号通路的影响。
方法采用转化生长因子β(TGFβ)刺激HCF。根据HCF的干预情况分为四组：对照组、PYR组、TGFβ组(TGFβ 10 ng/ml)及TGFβ＋PYR组。采用流式细胞仪分析细胞周期分布；羟脯氨酸法检测COL1含量；反转录酶－聚合酶链锁反应法(RT－PCR)测定结缔组织生长因子(CTGF)和Smad3的mRNA表达量；免疫印迹法测定CTGF、Smad3及pSmad3的蛋白表达量。
结果与对照组相比，TGFβ组的S/G2期细胞比例、COL1合成量、CTGF的mRNA和蛋白表达量、Smad3的mRNA和蛋白表达量及pSmad3蛋白表达量均增高(P均<0.05)。采用TGFβ 10 ng/ml与不同浓度PYR处理HCF后发现PYR 100 μmol/L可使S/G2期细胞比例最低。与TGFβ组相比，TGFβ＋PYR组(TGFβ 10 ng/ml ＋ PYR 100 μmol/L)的S/G2期细胞比例(30.8%±1.4%比48.6%±3.5%)、COL1合成量(0.95±0.15比1.25±0.18)、CTGF mRNA(1.73±0.10比2.92±0.12)及CTGF蛋白表达量(1.23±0.42比2.36±0.62)均下降(P均<0.05)。两组的Smad3 mRNA及Smad3、pSmad3蛋白表达量差异无统计学意义(P均>0.05)。
结论PYR可减轻TGFβ诱导的HCF增殖和COL1表达，其机制可能与抑制CTGF的表达有关。