负载CCR5抗体的纳米颗粒治疗小鼠子宫内膜异位症的实验研究

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目的

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米颗粒作为蛋白质载体用来负载CC型趋化因子受体5抗体(anti-CCR5),合成负载anti-CCR5的PLGA纳米颗粒(简称:PLGA/anti-CCR5),分析其抑制小鼠子宫内膜异位症的动物实验研究。

方法

合成PLGA/anti-CCR5纳米颗粒,分析纳米颗粒中anti-CCR5的累积释放。建立小鼠子宫内膜异位症模型,并分为对照组、anti-CCR5组、PLGA/anti-CCR5组,同时分离、培养异位内膜细胞(EEC)及腹腔液中的巨噬细胞;流式细胞仪检测各组腹腔液中巨噬细胞的比例,ELISA方法测定各组腹腔镜中细胞因子白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。用5-溴脱氧尿苷细胞增殖检测试剂盒和人工基底膜基质凝胶matrigel侵袭检测试剂盒检测EEC的增殖、浸润情况,同时,检测IL-10抗体和TGF-β抗体作用后EEC的增殖和侵袭情况。

结果

成功合成了PLGA/anti-CCR5纳米颗粒,成功建立了小鼠子宫内膜异位症模型。PLGA/anti-CCR5纳米颗粒在第3~24天可持续释放anti-CCR5。PLGA/anti-CCR5组巨噬细胞比例逐渐减少,第7天[(4.5±1.5)%]与第3天[(6.3±0.6)%]、第14天[(2.6±0.7)%]与第7天分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01、P<0.05);在第7、14天,PLGA/anti-CCR5组的巨噬细胞比例较anti-CCR5组下降更明显(P<0.01)。在第7、14天,PLGA/anti-CCR5组相比于anti-CCR5组IL-10和TGF-β的水平更低(P<0.01),且PLGA/anti-CCR5组在第3、7、14天IL-10和TGF-β的水平逐渐减少(P<0.01)。IL-10抗体+TGF-β抗体联合作用后EEC的增殖和侵袭[分别为(70.8±7.6)%、(50.2±9.1)%]相比于单用均降低(P<0.05)。

结论

在小鼠子宫内膜异位症模型中,PLGA/anti-CCR5纳米颗粒可能通过抑制巨噬细胞分泌IL-10和TGF-β来抑制EEC的增殖和侵袭,PLGA/anti-CCR5纳米颗粒为子宫内膜异位症的治疗提供了新的思路。

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