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目的：构建基于Tat细胞穿透肽和核定位信号NLS的重组酶Cre蛋白表达载体，引导Cre内化并人核实现细胞水平的基因敲除。方法：在带His标记的细胞穿透肽Tat和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达载体pET14b—SBP-Tat—EGFP基础上，利用酶切连接的方法将NLS—Cre片段插入带上述表达载体中，构建新的融合蛋白表达载体pET14b—SBP-Tat—NLS-cre-EGFP；经酶切、测序鉴定载体构建正确后，将重组质粒转化BL21（DE3）宿主菌，经异丙基硫代一争I）I半乳糖苷（IPTG）诱导表达后，