椿皮提取物对Hela细胞增殖及凋亡相关作用机制研究

来源 :吉林农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gmzz2009
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目的 通过检测椿皮提取物对宫颈癌Hela细胞活力的影响,观察药物对细胞凋亡、细胞周期、细胞自噬及相关因子的调控作用,对引起细胞凋亡的分子机制进行初步研究。方法 体外培养Hela细胞,以不同质量浓度的椿皮提取物处理宫颈癌Hela细胞后,MTT法检测药物对Hela细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测椿皮提取物对Hela细胞凋亡的影响;PI单染流式细胞术检测椿皮提取物对Hela细胞周期的影响;qRT-PCR检测椿皮提取物对Bcl-2/Bax mRNA水平表达的影响;Western-blot法测定Hela细胞凋亡因子Bcl-2、Bax及自噬相关因子蛋白的表达。结果 MTT结果显示椿皮提取物能抑制宫颈癌Hela细胞增殖,呈现剂量依赖性(P<0.05);质量浓度为5,10,20 μg/mL椿皮提取物处理Hela细胞48 h后,Hela细胞增殖抑制率及凋亡率明显上升,并且高于对照组(P<0.05);PI单染流式细胞术结果发现椿皮提取物诱导阻滞Hela细胞分裂G2/M期(P<0.05);qRT-PCR结果显示 Bax mRNA表达量升高,Bcl-2 mRNA表达量降低,呈剂量依赖性(P<0.05);Western-blot结果显示Bax蛋白表达量升高,Bcl-2蛋白表达量降低,LC3BⅡ/Ⅰ值升高,呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 椿皮提取物能明显抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,通过调控Bax、Bcl-2凋亡基因表达,阻滞细胞G2/M期,促进细胞发生凋亡,通过调控LC3B基因表达,促进宫颈癌细胞发生自噬。
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