探讨视黄酸通过视黄酸核受体α(RARα)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经元凋亡的影响。
方法采用维生素A缺乏饲料和维生素A正常的普通饲料分别构建视黄酸缺乏(RAD)和视黄酸正常(RAN)新生SD模型大鼠，随机选取24只RAD新生模型鼠作为RAD组，选取48只RAN新生模型鼠随机分为RAN组和假手术组，每组24只。RAN组和RAD组采用经典Rice法进行分离结扎左侧颈总动脉建立HIBD模型，假手术组只做颈部皮肤切开缝合。分别于术后第3天和第7天，采用TUNEL法检测脑皮质神经元凋亡情况，于术后第7、14、21和28天进行神经功能缺损评估。体外分离培养原代神经元，建立缺氧缺糖损伤(OGD)模型，将原代神经元细胞分为对照组、OGD组、视黄酸OGD组，采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测各组RARα、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)的mRNA及蛋白表达水平。采用RARα基因小干扰RNA重组腺病毒(Ad-si RARα)感染原代神经元，将原代神经元分为沉默组和阴性对照组，检测RARα、GDNF、Caspase-8的mRNA和蛋白表达水平。
结果①RAD组和RAN组大鼠在缺氧缺血后第3天到第7天，皮质凋亡神经元数量逐渐增加，且RAD组神经元凋亡数量明显多于RAN组；RAD组大鼠各时间点的神经功能损伤评分均高于RAN组(P<0.05)。②视黄酸OGD组神经元的RARα、GDNF mRNA表达水平[(1.49±0.05)、(0.61±0.02)]均高于OGD组[(0.51±0.04)、(0.21±0.02)]，Caspase-8的mRNA表达水平显著低于OGD组[(1.13±0.09) vs (1.79±0.11)]，且组间差异均有统计学意义(P<0.01)；各组神经元的蛋白表达水平与mRNA表达水平基本一致。③沉默组神经元的RARα、GDNF mRNA表达水平均低于阴性对照组[RARα(1.07±0.12) vs (2.33±0.08)，P<0.01]；GDNF[(0.11±0.01) vs (0.13±0.01)，P<0.05]，沉默组神经元的Caspase-8 mRNA表达水平较阴性对照组高[(2.92±0.20) vs (2.40±0.18)，P<0.01]；各组蛋白表达水平与mRNA表达水平基本一致。
结论视黄酸可通过RARα上调GDNF表达，下调Caspase-8的表达，进而抑制HIBD后神经元的凋亡。