分离肝星形细胞的简便方法

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目的 建立一种简便而可靠的肝星形细胞(HSC)的分离方法。方法 雄性SD大鼠,常规门脉穿刺插管,蠕动泵灌注不含钙D—Hanks液后游离肝脏,先后用含链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶消化液37℃体外灌注消化和振荡消化,细胞悬液过滤后,经11%Nycodenz密度梯度离心(2730r/min×15min)分离HSC,锥虫蓝染色排斥法鉴定细胞活率,以1×10^6mL^-1密度混悬后接种在培养瓶。结蛋白免疫细胞化学染色鉴定HSC纯度。结果 成功分离HSC,细胞得率(1.2~2.3)×10^6
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