小鼠Retn基因siRNAs的设计及其稳定表达载体的构建

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目的:设计小鼠Retn基因特异性的siRNAs,并构建一系列能在哺乳动物细胞内稳定表达这些siRNAs的表达质粒,以便为在体外研究Retn基因的功能打下基础。方法:(1)设计并合成小鼠Retn基因特异性的一组寡核苷酸片段,并克隆到pSilencer^HM1.0-Neo载体;(2)用电穿孔转染和G418筛选等方法建立能稳定表达相应siRNAs的一组3T3-L1细胞克隆;(3)诱导细胞分化为脂肪细胞,并用RT—PCR分析这些脂肪细胞内Retn基因的mRNA水平。结果:设计并构建了4个小鼠Retn基因特异性的s
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