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目的:初步探讨冬凌草甲素靶向Sema4D抑制非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖的作用机制和途径.方法:构建稳定过表达Sema4D慢病毒和阴性对照病毒的A549细胞株.实验分4组:稳定过表达Sema4D的A549细胞为过表达组,加入3.125μg/mL冬凌草甲素干预的稳定过表达细胞为给药组,稳定过表达阴性对照病毒的细胞为阴性对照组,未转染慢病毒的A549细胞为空白对照组.通过实时细胞分析系统检测冬凌草甲素对细胞增殖的影响;qRT-PCR和Western Blot分别检测各组Sema4D、PlexinB1、c-Met的mRNA和蛋白质表达水平.结果:增殖曲线显示:与空白对照组比较,阴性对照组无显著性差异,过表达组略有上升,给药组略有下降.CI值显示:与空白对照组和阴性对照组比较,过表达组48、72、96hCI值显著升高(P＜0.01),给药组的48h CI值显著降低(P＜0.01);与过表达组比较,给药组48、72、96hCI值显著降低(P＜0.01).qRT-PCR和Western Blot结果显示:与空白对照组和阴性对照组比较,过表达组的Sema4D、PlexinB1、c-Met mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01);给药组的Sema4D mRNA表达显著升高(P＜0.01);Sema4D、PlexinB1蛋白表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01);与过表达组比较,给药组的Sema4D、PlexinB1、c-Met mRNA和蛋白表达均显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:冬凌草甲素可能通过下调Sema4D表达,减少Sema4D与PlexinB1结合,抑制c-Met信号途径,从而抑制A549细胞的增殖,发挥抗NSCLC的作用.