神经元蛋白3.1结合蛋白酵母双杂交筛选体系的建立

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神经元蛋白3.1(P311)是肺泡发育的上游调节因子.以pEGFP-P311重组质粒为模板,利用PCR方法扩增P311基因编码序列.通过Nde I和BamH I位点插入诱饵载体 pGBKT7,构建重组诱饵载体pGBKT7-P311.重组体转化酵母菌AH109进行自激活和毒性检测,结果DNA-BD-P311融合蛋白无单独激活报告基因作用,对酵母菌亦无毒性.以出生11 d小鼠肺组织为材料,提取总RNA.逆转录产生单链cDNA,通过长距离PCR进行扩增.扩增产物ds cDNA电泳后可见大小为0.2~3.0 kb
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