【摘 要】
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目的 为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性.方法 收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所,北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心,北京 100005
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目的 为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性.方法 收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱作为细胞系的DNA指纹,然后与原始组织或国际数据库中已有细胞的STR谱进行比对,通过匹配度的高低判断该细胞是否被其他细胞交叉污染.对怀疑HeLa细胞污染的肿瘤细胞,检测其基因组中是否有人乳头瘤病毒18型(HPV-18)病毒插入片段.对怀疑T细胞白血病细胞污染的,则检测T细胞的各种特性(表面标志),根据表面标志表达情况判断是否为错误细胞.结果 本研究共收集了37种国内建立的肿瘤细胞系46个样品.本中心建立的6株细胞系均STR正确.其他单位建立的细胞系中有8株系正确,有23(62.2％)株系认定为错误细胞,人宫颈癌细胞HeLa是主要污染源;另外发现有些国内自建的细胞系被人结直肠癌细胞HCT-8、宫颈鳞癌细胞SiHa、T细胞白血病细胞CCRF-CEM及大鼠细胞污染.结论 国内建立的肿瘤细胞很高比例地发生了细胞间的交叉污染,科研人员在实验前一定要首先进行细胞身份认定,或者从国家实验细胞资源共享服务平台选择细胞.另外,建立细胞系时保留原始组织用于后续细胞系的身份认证.
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