【摘 要】
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日的构建CIpP原核表达载体,获取原核表达的CIpP蛋白分子.方法 分离培养TIGR4型肺炎链球菌,获取其染色体DNA,采用基因体外重组的方法将完整的CIpP读码框克隆到pET-32a原核表达
【机 构】
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重庆医科大学,医学检验系,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆400016重庆医科大学,附属第二医院感染科,重庆400010;
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日的构建CIpP原核表达载体,获取原核表达的CIpP蛋白分子.方法 分离培养TIGR4型肺炎链球菌,获取其染色体DNA,采用基因体外重组的方法将完整的CIpP读码框克隆到pET-32a原核表达载体,并经测序鉴定,所表达的抗原蛋白用Western blot鉴定,镍柱纯化并透析复性,真空冷冻干燥保存.结果 测序结果证实克隆的基因与GenBank中的序列相符,Western blot证实获得了CIpP融合蛋白.结论 获得了高表达的重组抗原蛋白,经镍柱纯化后纯度可达90%以上.
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