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目的：通过网络药理学的方法研究“三骨汤”治疗骨转移癌的作用机理。方法：利用TCMSP、TCMID和TCM Database@Taiwan数据库筛选药物主要有效成分，利用Swiss Target Prediction和TCMSP数据库检索“三骨汤”相关治疗靶点，通过DisGeNet和Drugbank检索骨转移癌疾病基因，并将药物作用靶点和疾病基因进行映射，通过Cytoscape3.8.1软件进行可视化并筛选出核心基因，对潜在治疗靶点进行GO和KEGG通路分析。结果：“三骨汤”的主要有效成分有29个，包含413个靶蛋白。骨转移癌的疾病靶点有773个，其中112个是“三骨汤”治疗骨转移癌的潜在靶点。通过GO和KEGG通路分析发现“三骨汤”治疗骨转移癌是通过TNF、ErbB、FoxO、PI3K-Akt、Toll样受体、NOD样受体、Rap1等信号通路发挥抗癌、抑制骨转移和免疫调节的作用机制。“三骨汤”治疗骨转移癌的关键基因为VEGFA、AKT1、IL6、TP53、MAPK3、SRC、EGFR和CASP3等。结论：本研究通过网络药理学构建多层次相互作用的“中药-化合物-靶点-通路”网络示意图发现“三骨汤”治疗骨转移癌的作用机理涉及多个靶点和通路，可能与抗癌、抑制骨转移、调节免疫等相关。