含有人端粒酶反转录酶的溶瘤腺病毒Ad11联合异环磷酰胺对人骨肉瘤细胞的杀伤作用及其机制

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目的

探讨溶瘤腺病毒Ad11联合异环磷酰胺对人骨肉瘤细胞的杀伤作用及机制。

方法

体外培养人骨肉瘤细胞株MG63,采用细胞毒性检测法(MTS法)检测Ad11的50%最大效应浓度(EC50)和异环磷酰胺的25%抑制浓度(IC25)和50%抑制浓度(IC50)。使用MTS法分别检测对照组、Ad11组[转染复数(MOI)=5]、异环磷酰胺组1(IC25=15 μmol/ml)、异环磷酰胺组2(IC50=25 μmol/ml)、联合组1(Ad11+IC25)、联合组2(Ad11+IC50)的细胞活性。Western blot技术检测对照组和实验组的自噬相关蛋白Beclin-1和LC3A/B的表达。

结果

MTS实验显示Ad11处理骨肉瘤细胞,其EC50值为5.26 MOI,联合异环磷酰胺后对骨肉瘤细胞MG63具有协同杀伤作用。Western blot结果显示Ad11联合异环磷酰胺处理细胞时,异环磷酰胺引起的细胞自噬作用受到抑制。

结论

Ad11对骨肉瘤细胞株MG63具有杀伤作用,联合异环磷酰胺时杀伤作用增强,该协同作用可能是由于Ad11减弱了MG63细胞的保护性自噬作用。

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