人胰岛素样生长因子在pET-DsbA载体中的克隆及表达

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目的通过重组技术,对胰岛素样生长因子IGF-Ⅰ基因进行缺失、突变以获得最有利于高水平表达的IGF-ⅠcDNA。构建原核表达载体,并进行表达,以获得能够高水平表达高活性产物的基因工程菌珠。方法提取人肝脏组织总RNA,RT-PCR后琼脂糖电泳初步鉴定产物。将cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS,酶切鉴定后,对IGF-Ⅰ基因进行序列分析。采用PCR法从克隆质粒中扩增IGF-Ⅰ片段,亚克隆至pET-DsbA原核表达载体,酶切鉴定,并进行序列测定。转化到大肠杆菌BL21(DE3)PLysS中,IPTG诱导表达,聚丙
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