【摘 要】
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以中国南方主要栽培果树砂梨基因组为材料,采用改进的CTAB法提取叶片基因组DNA,通过单因素试脸,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子如dNTPs浓度、DNA模板含量,Taq DNA聚合酶量
【机 构】
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中南林业科技大学林学院,湖南农业大学园艺园林学院
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以中国南方主要栽培果树砂梨基因组为材料,采用改进的CTAB法提取叶片基因组DNA,通过单因素试脸,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子如dNTPs浓度、DNA模板含量,Taq DNA聚合酶量、引物用量以及最适退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合砂梨的ISSR-PCR反应体系和应用程序为为：20μLPCR体系中,1xTaq酶配套缓冲液,0.5UTaq DNA聚合酶,0.7μmol/L引物,100μmol/L dNTPs,2.25mmol/L MgCl2,40ng模板DNA。最佳扩增程序为：预变性：94
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