E-cadherin启动子的荧光示踪体系的建立及验证

来源 :湖南大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wujuan0902

【摘要】

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为实现对肺癌A549细胞的EMT示踪,构建了E-cadherin基因启动子的慢病毒质粒,并与包装质粒pVSVG、Δ8.91共转染HEK293T细胞,包装成有活性的慢病毒,收取病毒感染A549细胞,利用流

【作者】

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谭拥军吴东丽余雳陈燕

【机构】

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湖南大学生物学院

【出处】

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湖南大学学报:自然科学版

【发表日期】

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2020年12期

【关键词】

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启动子 E-CADHERIN 示踪肺癌细胞 promoterE-cadherintracerlung cancercell

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目(84172718)

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为实现对肺癌A549细胞的EMT示踪,构建了E-cadherin基因启动子的慢病毒质粒,并与包装质粒pVSVG、Δ8.91共转染HEK293T细胞,包装成有活性的慢病毒,收取病毒感染A549细胞,利用流式细胞仪和Western blot检测感染成功.进一步用TGF-β诱导感染成功的A549细胞,通过在荧光显微镜下观察荧光变化、荧光定量PCR和Western blot检测GFP和E-cadherin的变化,发现在TGF-β诱导48 h后,A549细胞形态由鹅卵石样变成长梭形.并且荧光显微镜观察到相比较于未诱

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