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对革兰氏染色经典法和三步法进行了试验比较,发现革兰氏染色三步法过程简单、效果好、成功率高。操作过程中,只需控制好菌龄14~16h,复红乙醇脱色染色时间大于60s等关键步骤,初学革兰氏染色学生实验的成功率高达87.5%。革兰氏染色三步法具有良好的技术稳定性和可操作性,有利于提高学生实验技能和增强学生实验自信心,可在细菌革兰氏染色实验教学中推广使用。