【摘 要】
：
目的构建携带miR-196b的慢病毒表达载体,为研究miR-196b在慢性粒细胞白血病中的功能及其对慢粒发生发展的作用奠定基础。方法以人骨髓细胞基因组DNA为模板,PCR法扩增miR-196b
【机 构】
：
南方医科大学基因工程研究所,广东省妇幼保健院新生儿科越秀院区
【基金项目】
：
广东省医学科研基金(B2013220);南方医科大学“科研启动计划”青年科技人员培育项目(2012);广东省科技计划项目(2012B031800135);广东省自然基金项目(S2011020003140)
论文部分内容阅读
目的构建携带miR-196b的慢病毒表达载体,为研究miR-196b在慢性粒细胞白血病中的功能及其对慢粒发生发展的作用奠定基础。方法以人骨髓细胞基因组DNA为模板,PCR法扩增miR-196b的前体序列,慢病毒表达载体plVTHM构建重组载体plVTHM-miR-196b,并包装病毒和进行滴度测定。用病毒液感染K562细胞,通过荧光观察转染效率和报告基因表达效率,用流式细胞仪分选感染后绿色荧光蛋白阳性的K562细胞,再用实时荧光定量PCR测定细胞内miR-196b的表达水平。最后用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况。结果成功构建了plVTHM-miR-196b慢病毒表达载体;载体中绿色荧光蛋白有较好的表达活性;与对照组细胞相比,试验组miR-196b表达水平有显著提升(P<0.05);K562细胞稳定过表达miR-196b后增殖水平显著下降(P<0.05)。结论成功构建了miR-196b过表达载体,并在K562细胞内稳定高表达,miR-196b有抑制K562细胞增殖的作用。
其他文献
作为多假设跟踪技术中的一项核心算法,匈牙利算法占用了多假设跟踪中大部分的运算时间。考虑到多假设跟踪中的指派问题具有其特殊性,即其效率矩阵是稀疏的,文中提出了一种对
目的:本研究旨在探讨手机使用与成瘾对大学生执行控制功能中的三个核心成分(注意转换,抑制控制,工作记忆)的影响。方法:研究一分别探讨手机使用与成瘾对大学生执行控制功能三
边部裂纹缺陷是中厚板常见的表面质量缺陷之一。分析表明,钢板边部的多条纵向微裂纹是连铸坯轧制过程中棱部侧翻产生的折叠。通过提高钢水纯净度,控制连铸坯冷却强度,减小横
利用1.2%烟碱·苦参碱烟剂在松沫蝉成虫羽化盛末期进行林间放烟,防治效果可达90%以上。该技术具有高效、便捷、易操作等优点,可在林业大面积推广应用。
阿塞拜疆面积仅有8．66万平方公里，人口只有850万左右，可谓“小国寡民”；但其富有石油资源并扼里海能源外运咽喉，成为大国在外高加索地区争夺的重点。1991年独立之初，阿塞拜疆一度内
<正> 八十年代初期,我因工作的关系接触无锡地方史资料,曾试作《裘廷梁思想初探》一文。今年适逢裘廷梁逝世五十周年,无锡市各界人士届时拟集会纪念。今爱就他的文化思想续加
随着我国社会整体经济水平的快速发展,国民平均生活质量大幅度提升,与此同时,人们对工程建筑项目的要求也越来越高,首当其冲的便是建筑项目的屋面防水性能。屋面防水属于工程
<正>以调解的方式解决民事纠纷、化解社会矛盾,有其固有的优势:首先,它体现了当事人在解决纠纷过程中的程序主体地位,充分尊重了当事人在自愿协商的基础上达成解决纠纷的合意
伴随着国民经济发展和人民生活水平提高,我国建筑行业赢来了更加广阔的发展空间,与此同时,随着建筑规模的逐渐扩大,对建筑地基施工技术要求也越来越高,也也间接给建筑施工质