输血传播病毒ORF2基因的克隆和原核表达

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zy15400444
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目的 克隆输血传播病毒(TTV)兰州株ORF2的基因,并构建原核表达载体。方法 通过巢式PCR,从一份兰州地区无偿献血员血清中扩增TTV病毒的ORF2基因,并克隆到pGEM-T载体中,进行核苷酸序列分析。然后亚克隆到高效表达质粒pET22b(+)中,构建表达载体ORF2-pET22,在大肠杆菌中诱导表达带有6个组氨酸标签的ORF2融合蛋白。用纯化的重组ORF2蛋白作为抗原,ELISA检测人血清样本中的TTV-IgG抗体。结果 ORF2基因与日本TA287株的同源性为99.3%。用TTV-PCR阳性的血清对
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