【摘 要】
：
目的 获得高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白并评价其免疫原性.方法 利用原核表达系统,以pET-11d作为载体,在大肠埃希菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达获得融合蛋白,之后采用DEAE阴离子交换和镍离子柱亲和层析进行纯化.通过Western Blot验证融合蛋白的抗原活性.同时以该蛋白免疫实验动物后测定血清中的抗体滴度.结果 成功获得很高纯度的丙型肝炎哑单位融合蛋白,EIA显示融合蛋白能够诱生
【机 构】
：
100052,北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室,100052,北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室,100052,北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室,1000
论文部分内容阅读
目的 获得高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白并评价其免疫原性.方法 利用原核表达系统,以pET-11d作为载体,在大肠埃希菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达获得融合蛋白,之后采用DEAE阴离子交换和镍离子柱亲和层析进行纯化.通过Western Blot验证融合蛋白的抗原活性.同时以该蛋白免疫实验动物后测定血清中的抗体滴度.结果 成功获得很高纯度的丙型肝炎哑单位融合蛋白,EIA显示融合蛋白能够诱生出高滴度的抗体.结论 原核表达系统表达的丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白具有较强的免疫原性,为丙型肝炎病毒治疗性和预防性疫苗的研制提供了一条新的途径。
其他文献
目的 调查分析某艾滋病治疗示范区人免疫缺陷病毒(HIV)-1感染者中隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染的情况及其影响因素.方法 采集某艾滋病治疗示范区97例经血感染HIV-1的感染者的血浆,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原与抗体(HBsAg与抗HBs)、乙型肝炎e抗原与抗体(HBeAg与抗Hbe)、乙型肝炎核心抗体(抗HBc)及丙型肝炎抗体(抗HCV);采用吸附柱法抽提HBV
目的 了解长沙地区Saffold病毒(以下简称为SAFV)在儿童呼吸道感染中的流行情况,探讨其与儿童呼吸道感染的相关性.方法 选取湖南省人民医院儿科医学中心2007年11月至2008年10月间643名因呼吸道感染住院儿童的鼻咽抽吸物.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time-PCR)方法 扩增SAFV的5UTR的基因片段,并且统计分析临床资料.结果 643份样本中共检测出SAFV阳性67
应用转染人肝再生增强因子(hALR)基因的Hep G2细胞筛选出一株肝细胞作为生物材料,并建立生物人工肝支持系统,经检测具有良好生物合成及转化功能.我们采用离线混合生物人工肝治疗慢加急性肝衰竭1例,报道如下。
目的 探讨阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎患者发生HBeAg血清学转换与HBV基因型、HBV特异性CTL的关系.方法 70例慢性乙型肝炎患者HBV DNA阳性(HBV DNA≥1×104拷贝/ml),HBeAg阳性45例,其中B基因型23例(51.11%),C基因型22例(48.89%).ALT＞2×正常参考值上限(ULN)、人白细胞抗原(HLA)-A2阳性,用阿德福韦酯(正大天睛药业公司生产)10 m
目的 建立EB病毒感染和鼻咽癌血清学检测的敏感,特异和有效的方法.方法 以EB病毒早期蛋白胸腺嘧啶激酶为检测抗原,建立ELISA和免疫纤维膜条方法,检测血清中的特异性的IgG抗体.结果 用ELISA和诊断条同时检测了401份血清,其中鼻咽癌患者血清127份.两种方法检测鼻咽癌患者血清抗体均阳性,274份门诊患者血清中,55份ELISA和诊断条检测抗体均阳性,3份诊断条方法检测阳性的血清,ELISA
目的 构建和鉴定能够稳定携带肠道病毒71型（EV71）VPl基因的重组减毒伤寒沙门菌，用于口服EV71DNA疫苗的研发。方法利用DNA重组技术，构建表达EV71VPl蛋白的真核表达质粒VR．EV7lVPl，体外转染Vero细胞后检测目的蛋白体外表达和抗原性，并将该质粒电转化至减毒伤寒沙门菌SL7027。结果酶切鉴定证实构建含EV7lVPl基因的重组质粒，体外表达目的蛋白具有较好的抗原性．并获得稳定
中华医学会已明确要求，在用转／分钟（r／min）表示离心机转速时，要提供离心机半径，而用离心力“g”表达离心转速时，则不必提供离心机半径。
目的 建立一种基于多重RT-PCR结合反向斑点杂交技术的多种流感病毒核酸快速检测方法.方法 对5种亚型流感病毒的HA基因序列进行比对分析,选择合适的保守区域设计引物序列,并在扩增产物序列内部选择高变区设计探针序列.首先,使用生物素标记的引物扩增出同样带标记的PCR产物;然后,产物与膜上的探针杂交,通过生物素-亲和素反应,最后以斑点显色的方式来检测和鉴别不同亚型的流感病毒.实验中还通过摸索不同的引物
目的 探讨输卵管性不孕症患者生殖道衣原体和支原体感染的状况及药物敏感性,指导临床合理用药.方法 随机选取327例输卵管性不孕症患者作为不孕组和286名健康孕妇作为对照组,采集宫颈分泌物,检测沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)和人型支原体(MH),以及UU和MH耐药性.结果 不孕组CT感染率(14.99%)、UU感染率(23.24%)、UU+MH感染率(29.05%)、CT+UU+MH感染率(9
目的 探讨宫颈小细胞神经内分泌癌中高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染情况.方法 提取1例33岁宫颈小细胞神经内分泌癌患者手术切除组织癌变区域蜡块中的DNA,通过巢式PCR方法 检测其中HPV感染情况.结果 该患者肿瘤切除组织高危型HPV18型阳性.结论 利用巢式PCR方法 分型检测宫颈小细胞神经内分泌癌中的高危型HPV型别,其准确性及敏感性均较高。