FPLC纯化单克隆抗体(Fab')2片段

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:akk871204
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作者采用DEAE-40HR阴离子交换色谱柱,在Waters650E快速蛋白液相色谱系统(FPLC)建立了抗肝癌单克隆抗体(HAb18)F(ab')2片段的快速纯化方法。该法是将McAb用胃蛋白酶消化18h后,上阴离子交换色谱柱纯化,用pH7.510mmol/LPB洗脱,即得到纯化的F(ab')2.一次纯化周期仅需25min,一次上样量120~160ng蛋白,F(ab')2得率为34%,回收率为51%。经SDS-PAGE测定纯度大于95%,免疫荧光法测定活性为1:4000.该法操作简单、快速、实用性强,不需要高档次的色谱仪,只要有一台核酸/蛋白检测仪便可进行纯化,是实验室纯化F(ab')2的理想方法.
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